毛皮动物源大肠杆菌毒力和耐药基因检测及药物敏感性分析

论文摘要

为了解秦皇岛昌黎地区毛皮动物大肠杆菌毒力基因和耐药基因的分布及药物敏感性情况,以60只临床患病毛皮动物为试验菌株的分离宿主,采用常规分离纯化、生化鉴定以及分子生物学的方法对病原菌进行鉴定,动物致病性试验检测其致病性,PCR方法检测毒力基因和耐药基因,K-B法对常用西药进行药物敏感性检测,琼脂平板打孔法对中草药药物敏感性进行检测,试管二倍稀释法检测中草药的最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）。结果显示:此次分离到的28株大肠杆菌均使小鼠发病死亡;其中,24株大肠杆菌检测到irp2、fyuA毒力基因,检出率为85.7%;5株大肠杆菌临床分离菌株检出Ler、eaeA毒力基因,检出率为17.9%;耐药基因blaTEM、aadA1、blaCTX-M、blaTEM1、blaSHV-1、strA-strB、blaPSE1和blaOXA1的检出率分别为85.7%,89.3%,75.0%,71.4%,25.0%,24.1%,14.3%,14.3%;西药药敏试验结果显示,28株菌对链霉素、头孢拉定、多西环素、复方新诺明、林可霉素、替米考星、青霉素同时耐药;中草药药敏试验结果显示,诃子、乌梅、五味子对这28株大肠杆菌均具有较好的体外抑菌效果,抑菌圈直径为18～31 mm,MIC和MBC为15.63～500.00 g/L。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 菌株来源
•   1.2 主要试剂及仪器
•   1.3 西药药敏纸片
•   1.4 中草药
•   1.5 引物合成
•   1.6 试验动物
•   1.7 毛皮动物大肠杆菌的分离、纯化和初步鉴定
•   1.8 毛皮动物大肠杆菌生化鉴定和PCR鉴定
•     1.8.1 生化鉴定
•     1.8.2 PCR鉴定
•   1.9 细菌基因组DNA的提取
•   1.10 毒力基因检测
•   1.11 耐药基因检测
•   1.12 西药药敏试验
•   1.13 中药药敏试验
•     1.13.1 细菌活化及菌落计数
•     1.13.2 中草药体外抑菌圈的测定
•     1.13.3 中草药最小抑菌浓度 （MIC） 的测定
•     1.13.4 中草药最小杀菌浓度 （MBC） 的测定
•   1.14 动物致病性试验
• 2 结果
•   2.1 毛皮动物大肠杆菌生化鉴定和PCR鉴定
•   2.2 毒力基因及毒力基因检出率检测结果
•   2.3 耐药基因检测结果
•   2.4 西药药敏试验结果
•   2.5 耐药基因与耐药性的相关性
•   2.6 中草药体外抑菌试验结果
•   2.7 中草药对大肠杆菌MIC和MBC测定结果
•   2.8 动物致病性试验结果
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 高光平,朱利霞,王洪彬,史秋梅

关键词: 毛皮动物,大肠杆菌,毒力基因,耐药基因,药敏试验

来源: 中国兽医学报 2019年04期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 河北科技师范学院河北省预防兽医学重点实验室

基金: 河北省自然科学基金资助项目(C2015407033),河北省教育厅资助项目(SLRC2017037),河北省高层次人才资助项目(A2016005046),河北科技师范学院科学研究基金资助项目

分类号: S852.61

DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2019.04.12

页码: 671-677

总页数: 7

文件大小: 384K

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