谷氨酸棒杆菌ATCC 14067中L-精氨酸合成途径关键酶的过表达对L-精氨酸合成的影响

论文摘要

谷氨酸棒杆菌中与精氨酸合成相关的酶主要是由2个操纵子基因簇argCJBDFR和argGH编码合成。此外,在L-精氨酸合成途径的前体物谷氨酸和氨甲酰磷酸的合成中,由gdh、icd、gltA、carAB 4个基因分别编码的谷氨酸脱氢酶、异柠檬酸脱氢酶、柠檬酸合酶、氨甲酰磷酸合成酶是谷氨酸和氨甲酰磷酸合成的关键酶。研究以解除了L-精氨酸的别构抑制作用的谷氨酸棒杆菌为出发菌株,利用3种不同抗性的表达质粒分别对这些关键酶的编码基因进行串联共表达。在最终得到的13个菌株中,L-精氨酸产量最高的菌株是出发菌株L-精氨酸产量的6.23倍,这表明串联过表达菌株L-精氨酸合成途径中,不同节点关键酶的编码基因可以更有效地提高菌株中L-精氨酸的产量,为进一步改造L-精氨酸的合成途径、优化L-精氨酸的产量奠定了基础。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 菌株、质粒和引物
•   1.2 主要试剂
•   1.3 培养基和试剂的配制
•   1.4 方法
•     1.4.1 谷氨酸棒杆菌中表达质粒的构建
•     1.4.2 谷氨酸棒杆菌感受态制备及电转法
•     1.4.3 摇瓶发酵的条件
•     1.4.4 高效液相色谱法测定氨基酸的含量
•       1.4.4. 1 样品的制备
•       1.4.4. 2 色谱条件
• 2 结果与讨论
•   2.1 重组质粒的构建及转化
•   2.2 重组菌株的L-精氨酸产量
• 3 结果与讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 谢珊,蔡友华,李露

关键词: 谷氨酸棒杆菌,串联表达,精氨酸

来源: 食品科技 2019年08期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学

专业: 生物学

单位: 华南理工大学生物科学与工程学院广东省发酵与酶工程重点实验室广东省生物酶与工业绿色加工工程技术研究中心,广东肇庆星湖生物科技股份有限公司

基金: 国家自然科学基金项目(31671840)

分类号: Q78;Q936

DOI: 10.13684/j.cnki.spkj.2019.08.005

页码: 23-30

总页数: 8

文件大小: 3865K

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