根肿病的再侵染及根肿菌单孢系生物学特性、遗传多样性、生理小种分子鉴定

论文摘要

根肿病是十字花科作物的严重病害。根肿菌的生活史分三个阶段:土壤阶段、根毛侵染和皮层侵染阶段。一般认为根肿病是单循环病害,而再侵染是否存在未见相关研究报道。已有对根肿菌生理小种鉴定、生物学特性及遗传多样性的研究,主要是以根肿病田间根肿瘤作为研究材料。而田间根肿瘤生理小种经单孢系的鉴定研究表明,其内含有多个生理小种。故上述研究的结果应是一个混合群体的研究结果。本研究以单孢分离,获得单孢系,并以单孢系为材料,研究生理小种、生物学特性及遗传多样性。通过研究得到以下结果:1.根肿病的再侵染通过田间试验,选择高发病地区和不发病地区,采用初侵染病植株与健株并种的方法研究根肿菌的再侵染。本次实验首次观察到在四川成都地区冬油菜上有再侵染,再侵染的发病率和病情指数分别为:5.56%6.67%、3.334.81。通过测量植株的生长情况,发现再侵染病株与健株无显著性差异。2.根肿菌单孢系建立以及单孢系生物学特性采用Williams鉴别系统鉴别出来的4号和9号2个生理小种,利用琼脂块法挑取单孢,水培寄主继代扩繁的方法,得到了2个生理小种的62个根瘤,其中来自4号小种的单孢系30个,来自9号小种的单孢系32个。以实验室早期已获得的单孢系和本次建立的单孢系为材料,对根肿菌生理小种单孢系的生物学特性进行研究,发现生理小种单孢系的生物学特性间存有差异。其中病土浸提液对2号生理小种单孢系休眠孢子的萌发率促进作用大于未灭菌的根分泌物,但在1号生理小种和3号生理小种中单孢系相反;1号生理小种单孢系休眠孢子的致死温度为46℃,而2号和3号单孢系休眠孢子的致死温度为48℃。24℃为3个生理小种单孢系休眠孢子萌发的最适温度,但1号生理小种和2号生理小种单孢系在23℃时的孢子萌发率大于25℃时,而3号生理小种单孢系在25℃时的萌发率却高于23℃。3个生理小种单孢系在pH6.5时休眠孢子萌发率最高。光照对3个生理小种单孢系休眠孢子萌发均有抑制作用。3.单孢系根肿菌生理小种分子鉴定以及遗传多样性分析本实验选用Jing Z、Feng J和Manzanares-Dauleux M J的分子鉴定引物对来自大白菜根瘤的48个单孢系（分别来自2、4、9号生理小种）进行了生理小种分子鉴定。从48个单孢系根瘤中鉴定出4、5、7、9、11号生理小种。采用RAPD和SRAP方法对48个根肿菌单孢系进行了遗传多样性分析,并将其结果与分子鉴定结果作对比,发现RAPD和SRAP能在一定程度上对单孢系能按照生理小种和地理位置进行分类,但并不能完全准确的区分生理小种。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
•   1 十字花科根肿病研究现状
•     1.1 十字花科根肿病发生与危害
•     1.2 根肿病的症状
•     1.3 根肿菌的分类地位及形态
•     1.4 根肿菌的生活史
•     1.5 根肿病的病害循环
•     1.6 根肿菌的生物学特性
•     1.7 根肿菌生理小种研究进展
•     1.8 根肿菌单孢系的研究进展
•     1.9 根肿病的综合防控技术
•   2 根肿菌生理小种的分子鉴定
•   3 根肿菌遗传多样性
•     3.1 RAPD（随机扩增多态性DNA）
•     3.2 SRAP分子标记
•   4 选题的目的意义、研究内容、技术路线
•     4.1 选题的目的意义
•     4.2 研究内容
•     4.3 技术路线
• 第二章 油菜根肿病再侵染及对油菜生长的影响
•   1 材料与方法
•     1.1根肿病再侵染的室内盆栽实验
•     1.2 再侵染的大田实验及对油菜生长的影响
•   2 结果与分析
•     2.1再侵染的室内盆栽实验
•     2.2 再侵染大田实验及对油菜生长的影响
•   3 结论与讨论
•     3.1 根肿病的再侵染
•     3.2 初侵染和再侵染的概念与根肿病的初侵染、再侵染探讨
• 第三章 芸薹根肿菌生理小种单孢系的建立以及生物学特性分析
•   1 材料与方法
•     1.1 研究材料
•     1.2 实验方法
•   2 结果与分析
•     2.1 单孢分离
•     2.2 单孢系扩繁结果
•     2.3 休眠孢子的染色情况
•     2.4 不同基质对休眠孢子萌发的影响
•     2.5 温度对休眠孢子萌发的影响
•     2.6 pH对休眠孢子萌发的影响
•     2.7 光照对休眠孢子萌发的影响
•     2.8 致死温度测定
•   3 结论与讨论
•     3.1 芸薹根肿菌生理小种单孢系的鉴定
•     3.2 根肿菌生理小种单孢系生物学特性
• 第四章 根肿菌生理小种分子鉴定和遗传多样性
•   1 材料与方法
•     1.1 实验材料
•     1.2 实验方法
•   2 结果与分析
•     2.1 根肿菌检测PCR扩增电泳检测结果
•     2.2 根肿菌生理小种分子鉴定结果
•     2.3 RAPD-PCR扩增结果
•     2.4 RAPD的聚类分析
•     2.5 SRAP-PCR扩增结果
•     2.6 SRAP聚类分析
•   3 结论与讨论
• 参考文献
• 致谢
• 作者简介

文章来源

类型: 硕士论文

作者: 沈旭

导师: 黄云

关键词: 芸薹根肿菌,再侵染,单孢系,生物学特性,遗传多样性

来源: 四川农业大学

年度: 2019

分类: 基础科学,农业科技

专业: 生物学,农业基础科学,植物保护

单位: 四川农业大学

分类号: S432.4

DOI: 10.27345/d.cnki.gsnyu.2019.000553

总页数: 80

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