张金江
（解放军第２５１医院普通外科河北张家口０７５０００）
【中图分类号】Ｒ７３
５．２【文献标识码】Ｂ【文章编号】１６７２－３７８３（２０１５）０６－０１７７－０２
【摘要】目的探讨高迁移率族蛋白Ｂ１（ＨＭＧＢ１）和ＨＥＲ２在胃癌组织中的表达的意义。方法采用免疫组化ＥｌｉＶｉｓｉｏｎＴＭｐｌｕｓ法检测６８例胃癌组织中ＨＭＧＢ１和ＨＥＲ２的表达，并分析它们与胃癌临床病理特征的关系。结果ＨＭＧＢ１和ＨＥＲ２在胃癌组织中阳性表达率分别为阳性表达与胃癌的浸润深度、淋巴结有无转移差异有显著性；与组织学类型、发病年龄、性别差异无显著性。结论ＨＭＧＢ１和ＨＥＲ２在胃癌组织中表达与胃癌分化程度、侵袭、和淋巴结转移密切相关，检测ＨＭＧＢ１和ＨＥＲ２对判断胃癌生物学行为和预后有重要指导意义。
【关键词】ＨＭＧＢ１ＨＥＲ２胃癌病理
胃癌是最常见的消化道恶性肿瘤之一，胃癌的发生发展是一个多因素、多阶段的复杂过程，涉及到多个基因蛋白和众多分子水平的改变。癌基因以及促转移基因一直是胃癌的研究热点，高迁移率族蛋白Ｂ１（Ｈｉｇｈ－ｍｏｂｉｌｉｔｙｇｒｏｕｐｂｏｘ１，ＨＭＧＢ１）在多种恶性肿瘤中呈现高表达，且与肿瘤的恶性程度及预后密切相关［１－３］。ＨＥＲ２基因即ＣｅｒｂＢ－２基因，其表达的蛋白产物为人表皮生长因子受体２，后者的高表达可活化细胞信号转导系统，导致细胞转化、增殖。２０１４年第４版日本《胃癌治疗指南》推荐ＨＥＲ２阳性和ＨＥＲ２阴性应该选取不同的化疗方案。鉴于此，本文采用免疫组织化学的方法检测两者在胃癌组织的表达及其与胃癌临床病理因素之间的关系。
１材料与方法
１．１材料选取解放军第２５１医院普通外科２０１２年３月～２０１４年８月手术切除的胃癌组织８０例，患者男５６例，女２４例。年龄３９～７７岁，中位年龄为５８岁。其中高、中分化腺癌２７例，低分化或未分化腺癌５３例；采用２００２年美国癌症联合委员会（ＡＪＣＣ）ＴＮＭ分期标准
［４］，其中Ⅰ＋Ⅱ期２８例，Ⅲ＋Ⅳ期５２例。所有患者均行手术治疗并留取胃癌组织病理蜡块儿标本。所有入选的患者均经术后病理确诊，并且手术前均未接受任何放、化疗及生物治疗。
１．２主要试剂；兔抗人ＨＭＧＢ１多克隆抗体、鼠抗人ＨＥＲ２单克隆抗体及相关检测试剂盒均购自福州迈新生物技术公司。
１．３方法采用ＥｌｉＶｉｓｉｏｎＴＭｐｌｕｓ法免疫组织化学染色方法：石蜡切片脱蜡、水化，ＰＢＳ冲洗３×３ｍｉｎ；高温高压抗原修复；加３％过氧化氢溶液，室温下孵育１０ｍｉｎ，以阻断内源性过氧化物酶；ＰＢＳ冲洗３×３ｍｉｎ；加一抗，室温下孵育６０ｍｉｎ；ＰＢＳ冲洗３×５ｍｉｎ；加聚合物增强剂（试剂Ａ），室温下孵育２０ｍｉｎ；ＰＢＳ冲洗３×３ｍｉｎ；加酶标抗鼠聚合物（试剂Ｂ），室温下孵育３０ｍｉｎ；ＰＢＳ冲洗３×３ｍｉｎ；加新配制的ＤＡＢ显色液，苏木精复染，二甲苯透明、封片，显微镜下观察。
１．４结果判定ＨＭＧＢ１蛋白阳性表达位于细胞胞浆内，为棕黄色颗粒，细胞阳性表达以细胞内出现棕色颗粒为标准，随机选取１０个视野，切片中超过２０％的肿瘤细胞出现棕色染色为阳性表达，ＨＥＲ２阳性染色呈棕黄色颗粒表达于细胞膜上，整张切片无一个阳性细胞（－）；阳性细胞数＜１０％（＋）；阳性细胞数１０％～５０％（＋＋），阳性细胞数＞５０％（＋＋＋）。
１．５统计学处理所有计数资料均采用采用ＳＰＳＳ１３．０软件包，作χ２检验，相关性分析作Ｓｐｅａｒｍａｎ相关，以Ｐ＜０．０５表示差异具有统计学意义。
２结果
２．１ＨＭＧＢ１在胃癌组织中的表达及与临床病理特征的关系ＨＭＧＢ１主要表达于癌细胞的胞浆中，阳性表达率为４２．５％（３４／６８），阳性表达与肿瘤组织的分化程度、ＴＮＭ分期、浸润程度及淋巴结转移相关（Ｐ＜０．０５），与患者的年龄和性别无关（Ｐ＞０．０５）。见表１
３讨论
胃癌是我国常见的消化道的恶性肿瘤，由于本病进展较快、恶性程度高，患者就诊时大多数已经处于中晚期，虽然手术切除了肉眼可见的瘤体，但肉眼看不到的癌细胞以及淋巴结的转移都是较难彻底清扫干净的，这也是胃癌术后５年生存率一直不高的主要原因之一。随着分子生物学技术进步，有关胃癌发生发展以及促进转移的基因研究也取得了很大进展，ＨＭＧＢ１是近来发现的与肿瘤的发生、生长、浸润及转移有密切关系的染色质蛋白［５－６］。国内学者张靖等［７］研究发现ＨＭＧＢ１与众多消化道肿瘤都相关，并且可能参与了肿瘤的浸润转移。本研究结果显示，ＨＭＧＢ１蛋白在胃癌组织中阳性表达率为４２．５％，ＨＭＧＢ１在胃癌不同分化程度组织、不同ＴＮＭ分期、是否侵及浆膜层以及是否有淋巴结转移时均有显著差异性表达，这说明ＨＭＧＢ１在胃癌的发生发展过程中发挥了不可忽视的作用，其表达与胃癌的恶性程度呈正相关，因此ＨＭＧＢ１可以作为判定胃癌不良预后的一个参考指标。
ＨＥＲ２是表皮生长因子受体家族的成员之一，是一种具有酪氨酸蛋白激酶活性的膜结合蛋白，通常情况下，只在胎儿期表达，成年后，只在极少数组织内有低表达。近几十年来ＨＥＲ２的抗体赫赛汀在乳腺癌靶向治疗的研究和应用已经得到了广大学者的承认［８－９］，陈斌等［１０］研究显示ＨＥＲ２在胃癌组织的阳性表达率为３１．１％；裴波等［１１］研究显示ＨＥＲ２在胃癌组织中的阳性表达率为１０．４％；由于ＨＥＲ２在胃癌组织中阳性表达率国内学者之间以及国内与国外学者之间［１２］都存在差异，造成这种差异的原因是否与人种、不同公司的试剂以及染色方法的不同有关尚未见到学者的归纳总结，因此ＨＥＲ２在胃癌的预后判断和治疗方面必然存在争议。２０１４年日本对２０１０年第３版的日本《胃癌治疗指南》进行了修订，推荐胃癌患者第一次化疗前应行ＨＥＲ２检查，确定ＨＥＲ２阳性胃癌，含曲妥珠单抗的化学疗法为标准治疗［１３］。ＨＥＲ２阴性胃癌，基于日本国内Ⅲ期临床试验ＳＰＩＲＩＴＳ试验和ＪＣＯＧ９９１２试验结果推荐Ｓ－１＋顺铂方案，推荐度为１。在本研究中ＨＥＲ２蛋白在胃癌组织中阳性表达率为３３．８％，发现ＨＥＲ２的表达与胃癌的分化程度、ＴＮＭ分期、浸润深度及淋巴结转移相关，对胃癌的预后判断作为参考指标，也对胃癌患者化疗采取哪种化疗方案提供重要指导意义。
参考文献
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