（双流区妇幼保健院检验科四川成都610200）
【摘要】目的：探讨不规则抗体与新生儿溶血病之间的关系。方法：选取本院收治的新生儿溶血病待确诊患儿517例，采用微柱凝胶法进行不规则抗体检测，回归分析其临床资料。结果：517例待确诊患儿中，不规则抗体检测阳性8例，1例抗-M，1例抗-c，3例抗-E，3例抗-D。结论：在临床中，应对孕妇免疫球蛋白G（IgG）类红细胞血型相应不规则抗体筛查给予足够重视，采取科学有效的预防和治疗措施，及时为患儿进行换血与综合治疗。
【关键词】新生儿溶血病；不规则抗体；微柱凝胶法
【中图分类号】R446.6【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2017）36-0055-02
Clinicalsignificanceofirregularantibodydetectioninnewborninfants
WangYan.
Departmentofinspection,ShuangliuDistrictMaternalandChildHealthHospitalofSichuanChengdu,610200,China
【Abstract】ObjectiveToinvestigatetherelationshipbetweenirregularantibodyandhemolyticdiseaseofthenewborn.Methods517neonatesdiagnosedwithhemolyticdiseaseofthenewbornwereselected,andtheirregularantibodiesweredetectedbymicrocolumngelmethod,andtheclinicaldatawereanalyzedbyregressionanalysis.ResultsOfthe517childrentobeconfirmed,8casesweredetectedbyirregularantibody,1wereanti-M,1wereanti-c,3anti-E,and3anti-D.ConclusionIntheclinicalpractice,weshouldpayenoughattentiontothescreeningoftheirregularantibodyscreeningfortheimmunoglobulinG(IgG)erythrocytebloodgroup,andtakescientificandeffectivepreventionandtreatmentmeasures,andtimelyexchangeandcomprehensivetreatmentforthechildren.
【Keywords】Hemolyticdiseaseofthenewborn;Irregularantibody;Microcolumngelmethod
不规则抗体实际是指血清中抗-A、抗-B与抗-AB系统抗体外，其他各类型血型抗体的总和，之所以会出现不规则抗体，多因各种免疫刺激产生，如输血与母婴血型不合的妊娠等，以IgG型较为多见[1]。针对此种抗体而言，会诱发程度差异性的免疫性溶血性输血反应，针对新生儿而言，一般会引发胎儿、新生儿出现不同程度的溶血病症，严重者可导致胎儿流产以及新生儿智力发育不全，胆红素脑病，甚至死亡[2，3]。通过对不规则抗体进行全面、系统化检测，以此能及时且有效的为患者提供针对性治疗，或直接为患者进行换血。本次研究针对本院收治的517例新生儿溶血病待确诊患儿，对其开展不规则抗体检测，探讨其临床意义。
1.资料与方法
1.1对象
选取本院自2015年5月至2017年4月期间收治的517例新生儿溶血病待确诊的住院患儿，其中，男孩363例，女孩154例，平均（21.64±5.11）d。
1.2试剂
选用由美国DBL公司生产的单克隆血型抗体试剂；筛选谱红细胞（11人份）、红细胞（3人份），均购自上海血液生物医药有限公司；另外，所用离心机、微柱凝胶卡等，均购自达亚美公司。
1.3方法
1.3.1直接抗人球蛋白试验（DAT）。选用LISS/Coombs微柱凝胶卡，选取其中的1个孔，将50μl浓度为0.8%的红细胞悬液加入其中，离心操作，控制转速，即1030r/min，控制时间，即10min，最后对所得结果进行系统化判读。
1.3.2筛查不规则抗体。用LISS/Coombs微柱凝胶卡，从中选3个孔，依次向各孔中加入抗体筛查Ⅰ、Ⅱ与Ⅲ细胞，剂量均控制在50μl，然后，取患儿血清，分别加至孔。放置恒温环境中，调节温度至37℃，孵育处理，准确控制孵育时间，即20min，孵育后，离心处理，转速与时间同上，最后判读结果。如果不凝集，表明抗体筛选试验呈阴性，如果凝集，表明其呈阳性，作抗体鉴定。
1.3.3不规则抗体的鉴定。用两张LISS/Coombs微柱凝胶卡，选择其中的11个孔，将经抗体鉴定的1～11细胞加入对应孔中（均为50μl），而在第12个孔中，取患儿红细胞50μl，加入，作对照，后分别在各孔中，加放散液血清25μl。置于恒温中（37℃），孵育，然后用离心机，以1030r/min转速实施离心操作，时间为10min，完成上述操作后，便可判读结果。用位置、剂量效应及阳性排除法，深入、全面分析细胞反应格局，然后参照对照反应格局表，就抗体特异性进行准确判断。
1.3.4患儿母亲血型鉴定以及不规则抗体的筛选与鉴定。规则抗体筛选阳性标本筛选、鉴定患儿母亲血型鉴定及不规则抗体。
2.结果
所选取的517例新生儿溶血病待确诊患儿中，不规则抗体检测呈现阳性为8例，分别为1例抗-M，1例抗-C，抗-E、抗-D均为3例。8例患儿中，第1胎1为1例，其母亲在幼小时有输血经历，其余患儿均为第2～4胎。8例阳性病例其母亲血清抗体、妊娠和输血史以及患儿血清、放散液抗体情况，见表。
3.讨论
不规则抗体实际是与血型系Landsteiner法则不相符、不对应的血型抗体，即除抗-A、抗-B与抗-AB外的全部血型抗体。所谓新生儿溶血病（HDN），实际就是在母体中有不规则抗体，此抗体与胎儿红细胞IgG性质存在不配合、不符合状况，受此影响，母、胎可能会患上同种被动免疫性疾病；基于理论层面来考量，但凡是有IgG性质的不规则抗体，均能够诱发新生儿溶血病的发生。针对IgG性质抗体而言，由于其能经连接母体与胎儿的胎盘，进至胎儿体内的血循环中，破坏红细胞，引发严重的贫血、黄疸、水肿等症状，严重者还会诱发核黄疸[4]。由本次研究可知，在8例阳性患儿中，Rh系统达7例，占比为87.5%。此结果与相关报道基本保持一致[5]。表明，Rh系统的不规则抗体，是引发HDN的主要诱因。由于Rh系统产生不规则抗体，而引发的新生儿溶血病，实为一种被动同种免疫性疾病，诱因为Rh血型不合。针对此种溶血病来讲，在Rh阴性孕妇多次妊娠，且RhD阳性胎儿时，比较多见，针对胎儿RhD阳性红细胞而言，若其进入母体的血液循环中，便会对母体免疫系统形成强有力的刺激与冲击，从而非正常性产生大量的IgG，这些物质经胎盘进入到胎儿的血液循环，不断结合胎儿红细胞，并持续破坏胎儿红细胞，最终引发新生儿溶血病。
在8例患儿中，3例抗-D，占比为37.5%；3例抗-E，占37.5%；抗-c、抗-M均为1例，占比均为12.5%。此结果与有些报道相一致，但也有差异存在。究其原因，可能与各个地方开展Rh（D）血型检测的时间有关，以及其实际普及程度有关。本次研究检出的3例抗-D患儿，均为基层医院转诊。针对抗-D所造成的免疫溶血性输血反应，以及HDN情况，在大城市一直受到高度重视。在输血操作前，先对Rh（D）血型进行检查，若为阴性受血，给予Rh（D）阴性红细胞输注；若女性Rh（D）呈阴性，其在孕24～34周时，注射一定剂量的抗-D免疫球蛋白，阻断可进至母体的Rh（D）阳性血抗原通道，以此来有效预防由抗-D所导致的HDN，还能预防免疫溶血性输血反应。但针对广大基层医院而言，因文化水平、经济条件等因素影响与限制，Rh（D）血型检测未能得到较好落实。抗-E患儿3例，例数同于抗-D。针对我国汉族人而言，其Rh（E）阴性频率明显高于Rh（D），另外，当前国内在Rh血型检测方面，仅单纯性的建册Rh（D）血型，而在输血前，并没有对Rh（E）进行系统化检测，对于Rh（E）阴性者，当其处于妊娠期，如果接受Rh（E）抗原刺激，或采取输血刺激，那么容易产生抗-E。
8例患儿中，相合血液换血3例，并实施了综合治疗措施，如蓝光照射等，黄疸症状均得到明显好转，且均已康复出院，有较好的预后；其余5例通过维生素、白蛋白、蓝光照射等治疗后，好转并出院。由表1可知，患儿检出的抗体一致于母体内的抗体。若能了解母体内抗体，且于黄疸出现前，丙种球蛋白静注，或于出现黄疸时，则采用白蛋白静注，并联合蓝光照射治疗，治疗效果佳，另外，在住院时间方面也得到大幅缩短。为了有效预防新生儿溶血病，需切实做到优生优育，积极推行产前夫妇血型鉴定，做好孕妇不规则抗体的筛查工作，重点监测有早产史、流产史及黄疸史孕妇，做好各项早期预防举措。
综上所述，在临床中，应对孕妇IgG类红细胞血型相应不规则抗体筛查给予足够重视；依据不规则抗体所具有的实际特性，可选择没有抗原的血液，为患儿开展诸如换血等治疗，提升治疗实效性。
【参考文献】
[1]赵晓明，杨冀，胡靓，等.受血者不规则抗体筛查的临床意义[J].检验医学与临床，2015，12（A1）:159-161.
[2]张晨光，贺志安，赵庆伟，等.Rh血型系统不规则抗体与新生儿溶血病的相关性[J].现代预防医学，2007，34(11):2036-2038.
[3]林华峰，包广杰.孕妇血型不规则抗体检测在新生儿溶血病预防中的意义[J].国际检验医学杂志，2012，33(6):764-765.
[4]岳晓红，郭振欣.病理性黄疸新生儿不规则抗体筛选临床意义[J].河南预防医学杂志，2011，22(3):244-245.
[5]洪毅.不规则抗体致新生儿溶血病换血治疗的研究分析[J].现代检验医学杂志，2016，31(6):135-137.