苏云金芽孢杆菌以色列亚种毒素蛋白定量检测方法分析

论文摘要

为完善苏云金芽孢杆菌以色列亚种（Bacillus thuringrensis subsp. israelensis）毒素蛋白定量检测方法,试验用一定浓度的磷酸缓冲溶液、纯化水洗涤苏云金芽孢杆菌以色列亚种试样,去除培养基残留。用SDS-PAGE电泳法检测离心后收集到的试样菌体毒素蛋白含量。结果表明,通过磷酸缓冲液及水洗涤试样,解决了试样中杂质干扰毒素蛋白含量检测的关键性问题,采用该方法能够准确对苏云金芽孢杆菌以色列亚种两种主要相对分子质量的毒素蛋白进行检测与定量,且重复性好,检测误差可以控制在5%以内,并且检测结果与产品生物效价存在显著相关性。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 试剂
•   1.2 仪器
•   1.3 标样溶液的配制
•   1.4 Bti试样前处理
•     1.4.1 称样
•     1.4.2 干扰物质的消除
•     1.4.3 试样处理
•   1.5 SDS-PAGE电泳
•     1.5.1 聚丙烯酰胺凝胶制备
•     1.5.2 进样
•     1.5.3 电泳
•     1.5.4 固定
•     1.5.5 染色
•     1.5.6 漂洗、脱色
•   1.6 成像及数据处理
•     1.6.1 凝胶成像
•     1.6.2 数据处理
• 2 结果与分析
•   2.1 Bti试样预处理
•   2.2 线性关系考察
•   2.3 方法重复性
•   2.4 杀虫蛋白与生物效价相关性考察
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 金海燕,胡凌云,刘荷梅,周莉,胡虓,程治国,李青,刘华梅

关键词: 苏云金芽孢杆菌以色列亚种,毒素蛋白,凝胶,电泳

来源: 湖北农业科学 2019年03期

年度: 2019

分类: 农业科技,工程科技Ⅰ辑

专业: 化学,有机化工,植物保护

单位: 武汉科诺生物科技股份有限公司

分类号: O657.1;TQ453

DOI: 10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2019.03.026

页码: 96-101

总页数: 6

文件大小: 549K

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