三氟拉嗪与八肋游仆虫中心蛋白N端半分子的结合及对蛋白功能的影响

论文摘要

采用荧光光谱、圆二色光谱（CD）、等温滴定量热分析（ITC）、电泳及分子对接等分析技术,研究了三氟拉嗪（TFP）与八肋游仆虫中心蛋白N端半分子（apoN-EoCen）的结合,考察了TFP对apoN-EoCen性质的影响.结果表明,在室温下10 mmol/L Hepes缓冲溶液（pH=7. 4）中,TFP与apoN-EoCen以摩尔比1∶1结合于apoN-EoCen的第二个EF-手的E,F螺旋之间,条件结合常数约为103L/mol; TFP的结合导致蛋白质二级结构发生改变,α螺旋含量减小,Tb3+敏化荧光强度降低83%,apoN-EoCen切割DNA的类核酸酶活性明显受到抑制; Tb3+仍可占据复合物apoN-EoCen-TFP中蛋白质的2个金属离子结合位置,条件结合常数约为7. 0×105L/mol,TFP的结合不抑制金属离子诱导的蛋白质聚集.

论文目录

• 1实验部分
•   1.1试剂与仪器
•   1.2实验方法
•     1.2.1溶液的配制
•     1.2.2等温滴定量热分析
•     1.2.3圆二色光谱分析
•     1.2.4荧光测定
•     1.2.5共振光散射测定
•     1.2.6琼脂糖凝胶电泳分析
•     1.2.7分子对接模拟
• 2结果与讨论
•   2.1 TFP与apo N-EoCen的结合
•     2.1.1荧光光谱分析
•     2.1.2等温滴定量热分析
•     2.1.3 CD光谱分析
•     2.1.4 TFP与apoN-EoCen之间的F9rster共振能量转移
•     2.1.5分子对接模拟
•   2.2抑制剂TFP对apoN-EoCen性质的影响
•     2.2.1 TFP对apoN-EoCen聚集的影响
•     2.2.2 TFP对铽敏化荧光及蛋白构象的影响
•     2.2.3 TFP对apoN-EoCen类核酸酶活性的影响
• 3结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 叶旭文,张文龙,王志军,赵亚琴,杨斌盛

关键词: 三氟拉嗪,离子,光谱分析

来源: 高等学校化学学报 2019年11期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学

专业: 生物学,化学

单位: 山西大学分子科学研究所化学生物学与分子工程教育部重点实验室

基金: 国家自然科学基金(批准号:21571117)资助~~

分类号: O652;Q51

页码: 2257-2264

总页数: 8

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