南瓜多糖及其衍生物的制备与抗氧化活性研究

论文摘要

南瓜多糖是一种棕色粉末状的固体,是南瓜植物（Cucurbita moschata）中具有特殊生物活性的有效成分。南瓜多糖具有提高机体的免疫功能、抗氧化等生物活性。它的抗氧化活性体现在,能清除生命有机体在代谢过程中产生的许多自由基,包括超氧阴离子自由基（O2-·）、羟自由基（·OH）及其活性衍生物（H2O2）等。本文以本地菜市场购得的南瓜（蜜本南瓜）为原料,对南瓜多糖的提取、分离纯化、不同取代度的化学修饰、结构分析、抗氧化活性等方面进行了系统的研究,具体内容如下:1.通过实验条件及设施等方面考虑,本文采用热水浸提法提取南瓜多糖。接着采用Sevage方法脱去多糖中的蛋白,最终经过透析、恒温干燥得到南瓜多糖（P）。通过苯酚-硫酸法测定多糖含量,可以达到81.0%,说明热水提取方法以及使用Sevage方法脱蛋白方法是可行的。经过对红外光谱结果分析,可以初步说明南瓜多糖中的糖链,是由呋喃糖和吡喃糖组成的,并且有α-糖苷键。2.通过使用HSO3Cl-吡啶、POCl3-吡啶法,对南瓜多糖结构进行化学修饰,分别制备了两种不同取代度的硫酸酯化南瓜多糖（SP-1,SP-2）和磷酸酯化南瓜多糖（PP-1,PP-2）。SP-1和SP-2的取代度分别为0.35和0.65。PP-1和PP-2的取代度分别为0.01和0.02。然后分别对四种化学修饰产物,进行了糖含量、取代度、红外光谱和核磁共振碳谱的测定。经过测定实验证明,成功制备了不同取代度的硫酸酯化南瓜多糖和磷酸酯化南瓜多糖。3.使用紫外分光光度计,分别对南瓜多糖及其不同取代度的硫酸化（SP-1,SP-2）和磷酸化（PP-1,PP-2）衍生物,进行了三种体外抗氧化测试（·OH清除能力、O2-·清除能力、还原能力）,实验采用VC作为阳性对照。实验结果发现:对于不同取代度的硫酸化产物而言,SP-1和SP-2对·OH的清除效果,从总体来看差别不大,但仍可以看出SP-2的清除效果较好于SP-1,可是都低于VC和南瓜多糖的清除效果;对于O2-·的清除,SP-1和SP-2的清除效果都好于南瓜多糖,在较低浓度时,SP-2的清除能力和VC相当,而且还可以明显看出SP-2比SP-1的清除能力好;对于还原能力而言,VC的还原能力是最好的,而SP-1和SP-2的还原能力均低于南瓜多糖。对于不同取代度的磷酸化产物来说,PP-1和PP-2对·OH的清除能力,均强于南瓜多糖,但均低于VC,PP-2的EC50值仅为2.4 mg/mL,而且可以明显看出PP-2的清除能力高于PP-1。对于PP-1和PP-2清除O2-·的能力,VC的清除能力仍是最好的,但PP-1和PP-2的清除能力均明显强于南瓜多糖,在低浓度时,PP-2的清除效果好于PP-1;但在高浓度时,PP-1的清除能力明显高于PP-2,且PP-1的EC50值仅为3.0 mg/mL。对于PP-1和PP-2的还原能力而言,VC仍具有最好的还原能力,而与南瓜多糖相比,虽然总体相差不大,但还是均低于南瓜多糖的还原能力。总之,南瓜多糖及其4种不同取代度的硫酸化（SP-1,SP-2）、磷酸化（PP-1,PP-2）产物,均制备成功。抗氧化活性实验表明,经过不同取代度的化学修饰,的确能增强南瓜多糖某方面的抗氧化活性,为进一步研究南瓜多糖的抗氧化活性提供了实验依据。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 1 多糖的研究现状
•   1.1 植物多糖
•   1.2 微生物多糖
•   1.3 动物多糖
•   1.4 小结
•   1.5 多糖的提取方法
•     1.5.1 植物多糖的提取方法
•     1.5.2 微生物多糖的提取方法
•     1.5.3 动物多糖的提取方法
•     1.5.4 小结
•   1.6 多糖提取物中杂质的脱除
•     1.6.1 蛋白质的脱除
•     1.6.2 多糖的脱色
•   1.7 多糖的化学修饰
•     1.7.1 硫酸化修饰
•     1.7.2 磷酸化修饰
•     1.7.3 羧甲基化修饰
•     1.7.4 乙酰化修饰
•     1.7.5 硒化修饰
•     1.7.6 小结
•   1.8 南瓜多糖的研究现状
•     1.8.1 南瓜多糖的提取及分离纯化方法
•     1.8.2 南瓜多糖的化学修饰
•     1.8.3 南瓜多糖的抗氧化活性
•     1.8.4 南瓜多糖其他生物活性
•   1.9 选题依据及研究内容
• 2 南瓜多糖及其化学修饰产物的制备和结构表征
•   2.1 实验部分
•     2.1.1 实验试剂及仪器
•     2.1.2 南瓜多糖的制备
•     2.1.3 不同取代度的硫酸酯化南瓜多糖的制备
•     2.1.4 不同取代度的磷酸酯化南瓜多糖的制备
•     2.1.5 南瓜多糖及其衍生物总糖含量的测定
•     2.1.6 南瓜多糖衍生物的取代度值的测定
•     2.1.7 南瓜多糖及其化学修饰产物的结构表征
•   2.2 结果
•     2.2.1 总糖含量以及取代度分析
•     2.2.2 红外光谱（IR）分析
• 13C NMR和³¹P NMR分析'>    2.2.3¹³C NMR和³¹P NMR分析
•   2.3 讨论
•     2.3.1 南瓜多糖的提取与纯化方法讨论
•     2.3.2 南瓜多糖不同取代度的硫酸化和磷酸化产物的制备方法讨论
•     2.3.3 南瓜多糖的羧甲基化制备实验讨论
•   2.4 小结
• 3 南瓜多糖及其衍生物的体外抗氧化活性研究
•   3.1 实验部分
•     3.1.1 实验试剂及仪器
•     3.1.2 清除羟基自由基能力测定
•     3.1.3 清除超氧阴离子能力测定
•     3.1.4 还原能力测定
•   3.2 结果与讨论
•     3.2.1 南瓜多糖及其硫酸酯化产物清除羟基自由基能力
•     3.2.2 南瓜多糖及其硫酸酯化产物清除超氧阴离子能力
•     3.2.3 南瓜多糖及其硫酸酯化产物的还原能力
•     3.2.4 南瓜多糖及其磷酸酯化产物清除羟基自由基能力
•     3.2.5 南瓜多糖及其磷酸酯化产物清除超氧阴离子能力
•     3.2.6 南瓜多糖及其磷酸酯化产物的还原能力
•   3.3 讨论
•   3.4 小结
• 4 总结与展望
•   4.1 总结
•   4.2 本实验的创新点
•   4.3 展望
• 参考文献
• 附录 A：作者攻读硕士学位期间发表论文及科研情况
• 附录 B：缩写目录
• 致谢

文章来源

类型: 硕士论文

作者: 陈玲

导师: 黄刚良

关键词: 南瓜多糖,硫酸化,磷酸化,取代度,抗氧化活性

来源: 重庆师范大学

年度: 2019

分类: 基础科学

专业: 生物学

单位: 重庆师范大学

分类号: Q946

总页数: 71

文件大小: 4737K

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