VEGF基因转染脂肪干细胞后上清液对皮肤成纤维细胞及脐静脉血管内皮细胞的影响

论文摘要

目的:通过慢病毒将血管内皮生长因子（VEGF）基因转染于人脂肪干细胞（HADSCs）,检测其上清液（CM）中生长因子的表达,并用其上清液作用于人皮肤成纤维细胞（HDFs）及人脐静脉内皮细胞（HUVECs）,观察对这2种细胞活力和迁移的影响。方法:准备HADSCs、HDFs及HUVECs 3种细胞并鉴定;将携带VEGF165基因的慢病毒转染于HADSCs,定时收集上清液;ELISA法检验上清中生长因子分泌情况;将VEGF-CM与完全培养液以一定比例混合分为5组,分别培养HDFs及HUVECs,CCK-8法检验对2种细胞活力的影响;将最佳比例的VEGF-CM、正常CM（Nor-CM）和完全培养液分别作用于HDFs及HUVECs,划痕法测试出对2种细胞迁移的影响。结果:ELISA结果表明VEGF-CM中VEGF及碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的表达均较Nor-CM组提高;相对于其它比例,当完全培养液与VEGF-CM以1∶2的比例混合时,HDFs和HUVECs的活力显著增强（P<0.05）;VEGF-CM与其它培养液相比可显著提高HDFs和HUVECs的迁移能力（P<0.05）。结论:转染VEGF165基因后的HADSCs可同时增强VEGF及bFGF的分泌,其上清液可提高成纤维细胞及血管内皮细胞的活力和迁移能力。

论文目录

• 材 料 和 方 法
•   1 主要试剂与仪器
•   2 主要方法
•     2.1 HADSCs的分离、培养和鉴定
•     2.2 HDFs的培养和鉴定
•     2.3 HUVECs的培养和鉴定
•     2.4慢病毒转染HADSCs并收集上清
•     2.5检测上清中VEGF及bFGF的表达
•     2.6 VEGF-CM对HDFs和HUVECs活力的影响
•     2.7 VEGF-CM对HDFs和HUVECs迁移的影响
•   3 统计学处理
• 结 果
•   1 细胞的生物学特性
•   2 VEGF165慢病毒转染后HADSCs及细胞因子表达
•   3 VEGF-CM对HDFs及HUVECs活力的影响
•   4 VEGF-CM对HDFs及HUVECs迁移的影响
• 讨 论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 李江璇,肖丽玲,李升红,刘宏伟,潘潇寒,张碧雅

关键词: 脂肪源性干细胞,慢病毒,血管内皮生长因子,碱性成纤维细胞生长因子

来源: 中国病理生理杂志 2019年03期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学,基础医学

单位: 暨南大学附属第一医院整形外科

基金: 国家自然科学基金资助项目(No.81372065),广东省自然科学基金资助项目(No.S2013010015264)

分类号: R329.2

页码: 542-548

总页数: 7

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