基于胆固醇-DNA的活细胞膜修饰研究

基于胆固醇-DNA的活细胞膜修饰研究

论文摘要

目的·探讨连接胆固醇的脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid,DNA)对活细胞膜的修饰作用。方法·以悬浮细胞L1210和贴壁细胞PC-12为研究对象,将每种细胞分为实验组(胆固醇-DNA孵育)和对照组(磷酸盐缓冲液处理)。通过共聚焦显微镜获得2组细胞的荧光强度,并对实验组细胞进行三维重构。采用扫描电子显微镜观察实验组细胞的形态。采用荧光漂白恢复实验检测胆固醇-DNA修饰对细胞膜流动性的影响。结果·悬浮细胞和贴壁细胞获得了一致的结果。与对照组相比,实验组细胞表面的荧光强度有所加强(均P=0.000)。共聚焦显微镜的三维重构显示,实验组细胞的荧光分布在整个细胞表面。扫描电子显微镜结果显示,实验组细胞的形态经胆固醇-DNA修饰后并未改变。经荧光漂白处理后,实验组L1210细胞的相对荧光强度下降至0.090,且在110 s内恢复至0.860。结论·胆固醇-DNA能够对整个活细胞膜进行修饰,且修饰后的细胞膜仍具有流动性。该方法不仅能够用于悬浮细胞,还可应用于贴壁细胞。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 实验材料
  •   1.2 研究方法
  •     1.2.1 DNA设计与定量
  •     1.2.2 细胞培养
  •     1.2.3 胆固醇-DNA修饰活细胞膜
  •     1.2.4 共聚焦显微镜成像
  •     1.2.5 扫描电子显微镜成像
  •   1.3 统计学方法
  • 2 结果
  •   2.1 胆固醇-DNA修饰悬浮细胞L1210
  •   2.2 胆固醇-DNA修饰贴壁细胞PC-12
  •   2.3 胆固醇-DNA修饰后的L1210细胞膜流动性分析
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 刘江波,王丽华,左小磊

    关键词: 胆固醇,脱氧核糖核酸,细胞膜,修饰

    来源: 上海交通大学学报(医学版) 2019年09期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学

    专业: 生物学

    单位: 中国科学院上海应用物理研究所物理生物学研究室上海光源生物成像中心,中国科学院大学,上海交通大学医学院分子医学研究院上海交通大学医学院附属仁济医院

    基金: 国家自然科学基金面上项目(31470960),上海市教育委员会高峰高原学科建设计划(20171913)~~

    分类号: Q2-33

    页码: 970-974+969

    总页数: 6

    文件大小: 4027K

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