液相色谱串联质谱检测牙鲆鱼中的小清蛋白过敏原

液相色谱串联质谱检测牙鲆鱼中的小清蛋白过敏原

论文摘要

以合成肽段ALTDAETK为定量特征肽段,SDFIEEDELK及LFLQNFAFSASAR为定性肽段,建立牙鲆中小清蛋白高效液相色谱-串联质谱的检测方法。同时对蛋白提取液、碘代乙酰胺浓度、酶/蛋白质比例、酶解时间在内的前处理条件和肽段质谱参数条件进行了优化。结果显示,ALTDAETK肽段在0. 005~10 mg/L线性关系良好(R2> 0. 999),小清蛋白定量限2. 74 mg/kg;以大菱鲆为空白基质,重组小清蛋白的平均回收率为95%~102%,相对标准偏差(RSD)小于7%,重复性好。该文首次实现了用HPLC-MS/MS方法精确定量检测牙鲆中主要过敏原PV。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料与试剂
  •   1.2 仪器与设备
  •   1.3 方法
  •     1.3.1 重组PV的酶解
  •     1.3.2 样品前处理条件优化
  •     1.3.3 UPLC-Q-Exactive Focus MS条件
  •     1.3.4 LC-MS/MS方法的建立
  • 2 结果与分析
  •   2.1 特征肽段的选择
  •   2.2 前处理方法优化
  •     2.2.1 蛋白质提取液的优化
  •     2.2.2 IAA浓度的优化
  •     2.2.3 酶用量优化
  •     2.2.4 酶解时间优化
  •     2.2.5 酶解效率
  •   2.3 LC-MS/MS方法质谱参数优化
  •   2.4线性关系与定量限
  •   2.3.3 添加回收
  •   2.4 实际样品检测
  • 3 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 葛敏敏,王建华,林洪

    关键词: 牙鲆,小清蛋白,高效液相色谱串联质谱,过敏原,检测

    来源: 食品与发酵工业 2019年08期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑

    专业: 化学,轻工业手工业

    单位: 中国海洋大学食品科学与工程学院,青岛海关检验检疫技术中心

    基金: 国家自然科学基金(31771892)

    分类号: O657.63;TS254.7

    DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.018474

    页码: 210-214

    总页数: 5

    文件大小: 601K

    下载量: 171

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