VP3 G–H环中氨基酸突变对O型口蹄疫病毒生物学特性的影响

论文摘要

【目的】为了研究O型口蹄疫病毒VP3G–H环中氨基酸突变对其生物学特性的影响。【方法】借助口蹄疫病毒反向遗传操作技术平台拯救出2株定点突变体rHNV3174Y和rHND3173N+V3174E+N3179C。进行蚀斑形成试验、一步生长曲线的绘制、TCID50和LD50的测定、间接免疫荧光与激光共聚焦显微镜检测。【结果】结果显示,与骨架病毒rHN相比,虽然rHNV3174Y和rHND3173N+V3174E+N3179C对BHK-21细胞的感染性及其蚀斑表型和复制动力学无显著性差异;但rHNV3174Y和rHND3173N+V3174E+N3179C对乳鼠的致病力明显减弱,且均获得了小窝蛋白介导侵染CHO-K1细胞的能力。【结论】VP3上第3174位特征性氨基酸突变影响O型口蹄疫病毒感染宿主细胞的毒力及其内吞作用路径,这有助于我们认知VP3 G–H环在口蹄疫病毒粒子立体空间构象中潜在的作用。

论文目录

• 1 材料和方法
•   1.1 病毒、质粒和细胞
•   1.2 主要试剂
•   1.3 实验动物
•   1.4 VP3定点突变的FMDV基因组全长cDNA克隆构建
•   1.5 FMDV定点突变体的拯救与鉴定
•   1.6 蚀斑形成试验
•   1.7 一步生长曲线的绘制
•   1.8 TCID50的测定
•   1.9 LD50的测定
•   1.1 0 间接免疫荧光试验[17]
•   1.1 1 激光共聚焦显微镜检测[7, 9]
• 2 结果和分析
•   2.1 VP3定点突变的FMDV基因组全长cDNA克隆酶切鉴定与测序结果
•   2.2 FMDV定点突变体的拯救与传代结果
•   2.3 FMDV定点突变体的蚀斑表型和复制动力学
•   2.4 FMDV定点突变体的致病性
•   2.5 间接免疫荧光与激光共聚焦显微镜检测结果
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 陈冬冬,白兴文,宫晓华,包慧芳,李平花,李冬,付元芳,白启峰,袁红,孙普,马雪青,曹轶梅,陈应理,卢曾军,刘在新

关键词: 口蹄疫病毒,定点突变体,生物学特性,内吞作用

来源: 微生物学报 2019年07期

年度: 2019

分类: 基础科学,农业科技

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,OIE/国家口蹄疫参考实验室,兰州大学基础医学院,甘肃省新药临床前研究重点实验室

基金: 甘肃省青年科技基金(1606RJYA256),甘肃省自然科学基金(18JR3RA400),中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(1610312016018)~~

分类号: S852.65

DOI: 10.13343/j.cnki.wsxb.20180381

页码: 1285-1294

总页数: 10

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