开菲尔乳杆菌KL22的鉴定及其益生潜力评价

论文摘要

乳酸菌是一类革兰氏阳性、无芽孢、厌氧或兼性厌氧的细菌。乳酸菌中的乳杆菌属包含50多个种,大多数具有调节肠道菌群、提高人体免疫力等功能,干酪乳杆菌、植物乳杆菌、保加利亚乳杆菌等已被应用于乳制品等食品加工行业中。而开菲尔乳杆菌（Lactobacillus kefiri,L.kefiri）至今未列入国家可食用乳酸菌名单。因其具有免疫调节、抑制致病菌、降低血清胆固醇等作用,被广泛关注。本文以分离自波兰开菲尔粒的菌株为研究对象,对其功能性和发酵特性进行研究,以期为其开发利用提供理论依据。主要研究结论如下:（1）从波兰开菲尔粒中分离出一株菌,结合形态学鉴定、生化试验鉴定、分子生物学鉴定,证实该菌株为L.kefiri,命名为KL22。通过抗生素敏感性试验,确定菌株KL22对环丙沙星、万古霉素、复方新诺明和苯唑西林表现出抗性,对四环素为中度敏感,对其余25种抗生素表现为敏感。（2）菌株KL22具有较强耐酸性和一定的耐胆盐能力。通过疏水性试验、自凝聚力试验及Caco-2细胞粘附性试验,证明KL22具有较高的粘附能力,且菌液浓度为108CFU/mL时,其粘附数显著高于其它浓度,为24.59个/细胞。另外,KL22对OH-、O2-和DPPH都具有清除能力,其中,灭活组对DPPH的清除能力高达72.02%;对IL-8、TNF-α和hBD-2具有一定的调控作用,间接可调节免疫系统,提高宿主免疫能力。体外降胆固醇试验结果表明,菌株KL22具有一定的降胆固醇能力,其中活菌状态的KL22作用48 h后的胆固醇降解率为52.94%。（3）通过对菌株KL22的发酵特性研究,发现其有一定的自溶性和产酸能力,其最适发酵糖为麦芽糖,最适发酵温度为37℃;另外,还具有保质期内活菌数较高的特点。最后,选择5种基础发酵剂与菌株KL22共同发酵,结果表明,与基础发酵剂1共同发酵的酸乳,口感较好,pH、酸度、黏度、持水力等指标均较好。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第1章 绪论
•   1.1 益生菌
•     1.1.1 益生菌的概念及分类
•     1.1.2 益生菌的作用及其机制
•     1.1.3 益生菌产品
•   1.2 益生菌的筛选
•   1.3 开菲尔乳杆菌
•     1.3.1 开菲尔及开菲尔粒
•     1.3.2 开菲尔粒的菌相组成
•     1.3.3 开菲尔乳杆菌生理学特性
•     1.3.4 开菲尔乳杆菌的功能性
•   1.4 研究目的及意义
•   1.5 技术路线
• 第2章 开菲尔乳杆菌KL22的鉴定及抗生素敏感性评价
•   2.1 材料与设备
•   2.2 试验方法
•     2.2.1 菌落形态及理化指标检测
•     2.2.2 分子生物学鉴定
•     2.2.3 基于RAPD技术KL22株水平的鉴定
•     2.2.4 抗生素敏感试验
•   2.3 结果与分析
•     2.3.1 菌株KL22的菌落形态及理化指标鉴定结果
•     2.3.2 基于分子生物学的KL22分类鉴定
•     2.3.3 菌株KL22的RAPD指纹图谱
•     2.3.4 抗生素敏感试验
•   2.4 本章小结
• 第3章 开菲尔乳杆菌KL22的功能性初步研究
•   3.1 材料与设备
•   3.2 试验方法
•     3.2.1 生长曲线的测定
•     3.2.2 耐酸耐胆盐试验
•     3.2.3 疏水性试验
•     3.2.4 自凝聚力试验
•     3.2.5 细胞粘附试验
•     3.2.6 抗氧化试验
•     3.2.7 菌株诱导Caco-2细胞中基因的表达试验
•     3.2.8 菌株降胆固醇能力的测定
•   3.3 结果与分析
•     3.3.1 生长曲线的测定结果
•     3.3.2 耐酸耐胆盐试验结果
•     3.3.3 疏水性试验结果
•     3.3.4 自凝聚力试验结果
•     3.3.5 粘附性试验结果
•     3.3.6 抗氧化试验结果
•     3.3.7 菌株KL22诱导Caco-2细胞中基因在mRNA水平上的表达变化
•     3.3.8 菌株KL22的降胆固醇能力
•   3.4 本章小结
• 第4章 开菲尔乳杆菌KL22的发酵特性研究
•   4.1 材料与设备
•   4.2 试验方法
•     4.2.1 产酸能力测定
•     4.2.2 自溶性试验
•     4.2.3 最适发酵糖类的选择
•     4.2.4 最适发酵温度的选择
•     4.2.5 单菌株发酵乳在保存过程中的菌数和pH变化
•   4.3 结果与分析
•     4.3.1 菌株在改良MRS中的产酸性能测定结果
•     4.3.2 自溶性试验结果
•     4.3.4 开菲尔乳杆菌KL22最适发酵糖的确定
•     4.3.5 最适发酵温度的确定
•     4.3.6 菌株在牛乳中的菌数和pH变化
•   4.4 本章小结
• 第5章 开菲尔乳杆菌KL22在发酵乳中的应用研究
•   5.1 材料与设备
•   5.2 试验方法
•     5.2.1 凝乳试验
•     5.2.2 发酵乳保质期内理化指标的检测
•     5.2.3 发酵乳保质期内微生物的检测
•     5.2.4 发酵乳感官鉴评
•   5.3 结果与讨论
•     5.3.1 凝乳时间
•     5.3.2 发酵乳保质期内理化指标的变化
•     5.3.3 保质期内微生物数量的变化
•     5.3.4 感官评价结果
•   5.4 本章小结
• 结论
• 展望
• 创新点
• 致谢
• 参考文献
• 作者简介
• 攻读硕士学位期间发表的论文和科研成果

文章来源

类型: 硕士论文

作者: 赵彤

导师: 王永霞,王世杰

关键词: 益生菌,开菲尔乳杆菌,功能性,发酵

来源: 河北工程大学

年度: 2019

分类: 基础科学,工程科技Ⅰ辑

专业: 生物学,轻工业手工业

单位: 河北工程大学

分类号: TS201.3

总页数: 88

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