导读:本文包含了特异性治疗作用论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:特异性,免疫,因子,阿霉素,代谢物,色氨酸,神经元。
特异性治疗作用论文文献综述
张婷素,袁春樱,邱海江,屠小龙[1]（2019）在《血清特异性烯醇化酶、胃泌素释放肽前体在小细胞肺癌诊断和治疗效果评价中的作用》一文中研究指出目的分析神经元特异性烯醇化酶(NSE)和胃泌素释放肽前体(ProGRP)在小细胞肺癌(SCLC)诊断和治疗效果评价中的应用价值。方法回顾性分析2016年1月—2018年6月在宁波市中医医院首次确诊并化疗的52例小细胞肺癌(SCLC)患者和70例非小细胞肺癌(NSCLC)患者的临床资料,患者血清中NSE和ProGRP水平分别采用酶联免疫吸附测定法和化学发光法进行检测。结果治疗前SCLC组患者的血清NSE水平高于NSCLC组,差异有统计学意义(P<0.001),广泛期(ED)患者血清NSE水平高于局限期(LD)患者,差异有统计学意义(P<0.001);SCLC组患者的血清ProGRP水平高于NSCLC组,差异有统计学意义(P<0.001),ED患者血清ProGRP水平高于LD患者,差异有统计学意义(P<0.001)。经过2个周期化疗后,52例SCLC患者中有效组39例,无效组13例,有效组患者治疗后的血清NSE水平低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.001);无效组患者治疗前后血清NSE水平差异无统计学意义(P>0.05);有效组患者治疗后的血清ProGRP水平低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.001);无效组患者治疗后血清ProGRP水平高于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05)。结论血清NSE和ProGRP水平升高可能有助于SCLC患者和NSCLC患者的鉴别诊断,血清NSE和ProGRP水平可作为SCLC分期的辅助依据。ProGRP在监测SCLC病情变化、评估疗效等方面可能较NSE有更高的应用价值。(本文来源于《中华全科医学》期刊2019年06期）
陈润[2]（2019）在《适配体特异性修饰DNA纳米治疗系统抗肿瘤作用研究》一文中研究指出研究目的:用从噬菌体M13mp18中提取出来的长链单链DNA和相应的短链DNA制备出含有多个可修饰位点的DNA纳米管,通过修饰适配体C2NP,使得构建的DNA纳米管可以靶向淋巴瘤细胞,提高所载化学药阿霉素的抗肿瘤作用,降低毒副作用。通过调整C2NP的数量和间距,使其更好地发挥生物治疗作用,载药后可同时发挥C2NP的生物治疗作用和阿霉素的化学治疗作用,提高抗肿瘤效果。研究方法:用PCR仪将从噬菌体中提取出的两种M13mp18单链DNA与相应的短链DNA制备成螺旋的DNA纳米管和直形的DNA纳米管,通过延长链的方式将核酸适配体C2NP修饰到DNA纳米管结构上,制备出由不同数量和间距的C2NP修饰的可靶向淋巴瘤的DNA纳米管。通过琼脂糖凝胶电泳、透射电子显微镜和原子力显微镜等对DNA纳米管结构进行表征;DNA纳米管的载药量和体外释放用酶标仪测阿霉素的荧光强度来考察;琼脂糖凝胶电泳表征DNA纳米管在含10%胎牛血清培养基中的稳定性;载体材料和缓冲盐对人间变性大细胞淋巴瘤细胞K299的毒性、DNA纳米管载药系统对K299细胞的生物作用以及生物作用和化疗联合作用等采用CCK8法进行考察;用流式细胞仪考察K299细胞对载药DNA纳米管系统的定量摄取、载药DNA纳米管系统对K299细胞的凋亡、周期以及活性氧水平的影响;相关蛋白的表达量用Western Blot实验进行表征。研究结果:本研究成功构建了可靶向淋巴瘤细胞的DNA纳米管载药系统,将阿霉素载入到DNA纳米管中后能够提高阿霉素的稳定性;载药螺旋DNA纳米管和载药直形DNA纳米管的体外释放研究表明螺旋DNA纳米管对阿霉素有一定的缓释作用,而直形DNA纳米管对阿霉素无缓释作用;细胞实验结果显示,本研究所构建的DNA纳米管和缓冲液无细胞毒性。载入DNA纳米管中的阿霉素相比于游离阿霉素对K299细胞有更显着的增殖抑制作用,共同孵育4 h后,K299细胞对载药DNA纳米管组阿霉素的摄取量是游离阿霉素的2.37倍;当DNA纳米管上修饰30个C2NP且相邻之间的距离为6 nm时,对K299细胞的抑制率最为显着;生物治疗和化学治疗协同作用结果表明,载药以后,系统在增强阿霉素抗肿瘤作用的同时又发挥了生物治疗作用。载药DNA纳米管与K299细胞共同孵育48 h后,明显增强了细胞的晚期凋亡率,由游离阿霉素的37.7%提高到62.8%,主要通过阻滞S期和G_2期达到抑制细胞增殖,同时使细胞内的活性氧水平升高,进一步促进细胞凋亡。免疫印迹实验结果显示,修饰有一定数量和间距C2NP适配体的DNA纳米管载药系统可以诱导K299细胞中p53蛋白的表达增加。研究结论:本课题所构建的C2NP适配体修饰的DNA纳米管载药系统可以靶向到淋巴瘤细胞内,显着提高阿霉素的体外抗肿瘤作用,降低其毒副作用。并且C2NP修饰的载药系统可以同时发挥化学治疗作用和生物治疗作用,大大降低了用药的浓度。数量和间距可控的适配体修饰的DNA纳米载体为肿瘤的治疗提供了新思路。(本文来源于《郑州大学》期刊2019-04-01）
袁锡华[3]（2019）在《特异性免疫治疗在过敏性疾病中的作用研究进展》一文中研究指出特异性免疫治疗(specific immunotherapy,SIT)是指一种针对病源体的对症治疗方法,对于机体能力低下或亢进的免疫状态,身体可以通过免疫获得性感染(痊愈或无临床症状的感染)或接种疫苗来产生特异性抗体,并且调节过敏原特异性T细胞的反应类型,发挥抗过敏作用[1]。SIT的方法繁多,适用于多种疾病的治疗,例如肿瘤免疫可以激活人体免疫系统,例如肿瘤免疫可以激活人体免疫系统,SIT依靠自身免生物来杀死癌细胞和肿瘤组织,不像以往手术、靶向治疗和化疗,SIT是针对人体自身免疫系统,而不是肿瘤细胞和组织[2]。因此,本文通过在过敏性疾病中采用SIT的作用开展综述如下。(本文来源于《临床医药文献电子杂志》期刊2019年02期）
李兴锐,谭悦,刘童,葛显应,陆继娣[4]（2019）在《双特异性磷酸酶3和TNF-α对雷公藤多苷片治疗类风湿关节炎的预后作用及其受调节机制》一文中研究指出目的探讨双特异性磷酸酶3(dual specificity protein phosphatase 3,DUSP3)和TNF-α作为雷公藤多苷(tripterygium glycosides,TG)片治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)预后生物标记物的可行性和调节机制。方法选取本院于2016年3月至2018年1月收治的67例RA患者及67例健康志愿者,RT-PCR检测治疗前后外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)中DUSP3和TNF-α表达,并进行ROC分析。以TG处理脂多糖刺激的U937细胞,模拟TG片治疗RA,通过RT-PCR、Western blot和免疫共沉淀实验检测DUSP3和TNF-α之间的关系,及其上下游通路。结果与健康志愿者相比,RA患者(用药前)PBMC中DUSP3表达降低而TNF-α表达升高(P <0. 05)。TNF-α和DUSP3进行ROC分析的AUC分别为0. 948和0. 908。治疗后RA患者DAS28,ESR和CRP值下降,DUSP3和TNF-α表达分别升高和降低(P <0. 05)。TG片用药响应和不响应(骨侵蚀指标)的RA患者的DUSP3和TNF-α表达水平差异显著(P <0. 05)。以用药后DAS28表达变化区分RA患者是否响应TG片治疗,ROC分析显示DUSP3和TNF-α的AUC分别为0. 821和0. 747。在LPS刺激的U937细胞中,改变DUSP3或TNF-α表达不相互影响表达。Western blot结果显示NF-κB介导TG对TNF-α调节。ChIP结果证实TG抑制了HDAC1与DUSP3启动子区相互作用。Western blot结果表明TG给药抑制了LPS诱导的HDAC1上调和DUSP3下调。结论 TG片对RA有较好的治疗效果。其中,DUSP3和TNF-α可以作为TG片治疗RA的预后因子。TG给药降低了TNF-α的表达,并解除了对DUSP3的抑制。(本文来源于《第叁军医大学学报》期刊2019年01期）
刘沣[5]（2018）在《双特异性启动子调控溶瘤腺病毒介导P53治疗实验性脑胶质瘤的作用》一文中研究指出背景:溶瘤病毒综合了免疫治疗、生物治疗和基因治疗的优点,成为近年来胶质瘤治疗研究的焦点所在。一些研究证实了溶瘤病毒,特别是能够自我复制的溶瘤病毒对治疗肿瘤的有效性。自我复制的溶瘤病毒的治疗原理是:将抗肿瘤基因重组到可自我复制的病毒载体上,用以转染肿瘤细胞。肿瘤细胞由此表达抗肿瘤基因,产生对肿瘤的抑制甚至杀灭作用。但是,溶瘤病毒的特异性不高时,很容易诱发机体的不良反应。如何使溶瘤病毒特异性有效性地针对肿瘤细胞,同时避免对正常细胞的损害,成为溶瘤病毒能否有效的肿瘤治疗方案的关键所在。为了获得专门治疗胶质瘤的溶瘤腺病毒,我们通过给腺病毒载体加载两个启动子,使病毒在肿瘤细胞中能自我复制和产生P53蛋白抗肿瘤。使用这两个启动子,使溶瘤腺病毒Ad-Tp-E1A-EnGp-P53具有了针对胶质瘤细胞的特异性,大大提高了治疗的安全性。随后的体内外实验进一步验证了Ad-Tp-E1A-EnGp-P53治疗胶质瘤的有效性和特异性。目的:合成启动子hTERTp和杂合启动子GFAP,组装特异性的溶瘤病毒Ad-Tp-E1A-EnGp-P53治疗胶质瘤,并通过体内外实验验证其有效性和特殊性。方法:通过质粒构建和基因重组技术,成功构建了条件复制溶瘤腺病毒Ad-Tp-E1A-EnGp-p53。为了检测病毒Ad-Tp-E1A-EnGp-p53的特异性和有效性,以重组病毒Ad-CMV-EGFP作为对照,通过实验测定Ad-Tp-E1A-EnGp-p53在U251细胞中的作用;用TCID50和MTT实验,检测Ad-Tp-E1A-EnGp-p53对U251细胞的增长抑制;检测了病毒Ad-Tp-E1A-EnGp-p53干预后U251中P53蛋白的表达水平;检测了病毒Ad-Tp-E1A-EnGp-p53干预U251细胞后其凋亡因子Caspase-3的表达情况;建立了裸鼠U251模型,采用Ad-Tp-E1A-EnGp-p53干预肿瘤在裸鼠体内生长;并做了活体裸鼠的PET CT检测,了解病毒Ad-Tp-E1A-EnGp-p53对肿瘤生长、~(18)F-FDG摄取和SUV值的影响。裸鼠处死后,监测病毒Ad-Tp-E1A-EnGp-p53对肿瘤中原癌因子CREB的表达的影响。结果:(1)本实验成功构建了自我复制的溶瘤病毒Ad-Tp-E1A-EnGp-p53;病毒能特异性抑制胶质瘤细胞的生长,而对正常细胞无影响。(2)该病毒能在U251细胞中表达产生P53蛋白。Western blot实验显示病毒Ad-Tp-E1A-EnGp-p53提高了U251细胞中的P53蛋白含量(p<0.05),并与病毒的滴度有量效关系。(3)病毒Ad-Tp-E1A-EnGp-p53干预U251细胞,可增加细胞中Caspase-3及Cleaved-Caspase-3的表达(p<0.05)。(4)在裸鼠U251皮下胶质瘤模型中,病毒Ad-Tp-E1A-EnGp-p53表现出良好的肿瘤生长抑制效果,使原癌基因CREB表达下降(p<0.05);裸鼠活体PET-CT成像结果显示Ad-Tp-E1A-EnGp-p53干预组的裸鼠肿瘤区域缩小,~(18)F-FDG摄取明显减少,较空白组和对照组低,有统计学意义(p<0.05)。结论:本实验首次将hTERTp启动子与GFAP杂合启动子共同组装到病毒Ad-Tp-E1A-EnGp-p53中,获得了一种新型溶瘤腺病毒。在体内、外实验中,Ad-Tp-E1A-EnGp-p53对胶质瘤细胞生长有明显抑制作用,并且安全有效。这为未来临床上脑胶质瘤的综合治疗提供了一个新的选择。(本文来源于《贵州医科大学》期刊2018-05-01）
范文婷,钟世民,胡琦,曾靖,廖伟[6]（2018）在《色氨酸代谢物调控Th17/Treg分化在小鼠哮喘变应原特异性免疫治疗中的作用及机制研究》一文中研究指出目的对色氨酸代谢物调控Th17/Treg分化在小鼠哮喘变应原特异性免疫治疗中的作用及机制进行研究。方法将30只BALB/c鼠随机法分为5组:对照组、哮喘组、OVA-SIT组(OVA:鸡卵白蛋白;SIT:变应原特异性免疫治疗)、OVA-SIT+1-MT组(1-MT:IDO抑制剂,1-甲基色氨酸),OVA-SIT+1-MT+KYN组(KYN:色氨酸代谢产物,犬尿氨酸)。哮喘组:第0、7 d予OVA致敏,第6周每天予1%OVA雾化激发,50 d予10%OVA加强激发;OVA-SIT组:第4周每天予大剂量OVA皮下注射,余同哮喘组;OVA-SIT+1-MT组:第4周每天在腹腔内注入1-MT,1 h后予大剂量OVA皮下注射h,余同哮喘组;OVA-SIT+1-MT+KYN组:第3周每天加入1-MT,第4周每天加入KYN,末次加入KYN后1 h予大剂量OVA行免疫治疗,余同哮喘组。末次激发6 h内检测气道高反应性;对支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞计数分析;ELISA检测血清Ig E及BALF中IL-5、IL-10、IL-17;流式细胞技术检测脾脏CD4+RORγt+T及CD4+Foxp3+T细胞分化情况。结果 OVA-SIT+1-MT+KYN组较OVA-SIT+1-MT组酸性粒细胞浸润减少,炎症反应明显减轻。前者BALF中Il-5为74.8~86.8(83.48±6.02)pg/m L,IL-17为33.8~46.5(38.72±4.61)pg/m L,CD4+RORγt+T细胞为2.45~2.82(2.60±0.14)%,CD4+Foxp3+T细胞为7.83~9.09(8.36±0.53)%;后者BALF中Il-5为240.3~285.1(259.65±16.27)pg/m L,IL-17为55.2~65.8(59.97±3.76)pg/m L,CD4+RORγt+T细胞为4.31~5.34(4.94±0.38)%,CD4+Foxp3+T细胞为5.93~6.59(6.33±0.28)%,因此OVA-SIT+1-MT+KYN组中Il-5、IL-17细胞因子以及脾脏中CD4+RORγt+T细胞均明显低于OVA-SIT+1-MT组,差异均有统计学意义(P<0.01),而前组脾脏中CD4+Foxp3+T细胞水平明显高于后者,差异有统计学意义(P<0.01)。结论色氨酸代谢产物有助于特异性免疫治疗减轻气道炎症作用,其机制与通过调控Th17及Treg分化有关。(本文来源于《第叁军医大学学报》期刊2018年08期）
李贺侠[7]（2017）在《PI3K/AKT信号通路在FABP疫苗特异性免疫治疗中的作用机理研究》一文中研究指出目的:探讨PI3K/AKT信号通路在FABP疫苗特异性免疫治疗中的作用机制。方法:1)用分子生物学方法合成Blo t序列基因片段,然后将其插入原核表达空质粒pET28a(+)中,以T4 DNA连接酶构建含pET28a(+)和Blo t的重组质粒pET28a(+)-Blo t,采用限制性内切酶对保存于本实验室的空质粒pET28a(+)以及在本次实验中所构建的重组表达质粒pET28a(+)-Blo t进行双酶切鉴定处理。2)将重组表达质粒pET28a(+)-Blo t转化入E.coli DH5a感受态细胞,进行菌落PCR、筛选阳性克隆以及测序鉴定,测序分析正确后,使用IPTG诱导目的蛋白FABP的小剂量表达,优化表达条件后再诱导目的蛋白FABP的大剂量表达和纯化,接着用SDS-PAGE和Western bloting方法对表达纯化的目的蛋白FABP进行检测验证分析,最后,采用SK3071非干扰型蛋白定量试剂盒测定目的蛋白FABP的浓度。3)以热带无爪螨粗制提取液制备哮喘小鼠模型,40只雌鼠随机分为4组:阴性对照组、哮喘组、FABP免疫治疗组和PI3K抑制剂组。其中哮喘组、FABP免疫治疗组和PI3K抑制剂组各小鼠分别在实验的第Od、7d、14d行腹腔叁次注射热带无爪螨变应原粗制提取液以敏化各小鼠,并于第21d起雾化吸入激发,30min/次/天,连续7天;而阴性对照组则同时使用相等剂量的PBS对各小鼠行腹腔注射和雾化激发处理。FABP免疫治疗组和PI3K抑制剂组于第25d、26d、27d雾化前0.5h,腹腔注射疫苗FABP对各小鼠进行免疫治疗;而PI3K抑制剂组则于使用疫苗FABP对各小鼠行免疫治疗前1.5h雾化给予PI3K抑制剂LY294002;阴性对照组则同时使用相等剂量的PBS对各小鼠行腹腔注射治疗和雾化激发处理;同时阴性对照组、哮喘组、FABP免疫治疗组在治疗前用等量抑制剂溶解剂DMSO雾化处理。4)各组小鼠在末次雾化激发后24h内进行取材处理,接着对各小鼠行相关检测:ELISA法检测实验组各小鼠BALF中及脾培养上清中IL-4、IL-5、IL-13、IL-17、IL-10和IFN-γ细胞因子及血清中特异性抗体IgE、IgG1和IgG2a的含量,并作肺组织病理切片和BALF中细胞分类计数,最后提取肺组织蛋白行Westblot检测通路信号蛋白及磷酸化(Akt、p-Akt、IKB-a和p-IκB-a)情况。结果:1)双酶切和测序鉴定结果说明,本实验已经成功构建了重组质粒pET28a(+)-Blo t。2)SDS-PAGE和Western bloting检测结果说明本实验已经成功诱导表达并纯化了目的蛋白FABP;根据标准曲线计算出纯化的目的蛋白FABP的浓度为1.12mg/ml。3)ELISA法检测结果说明,与哮喘组进行比较,FABP免疫治疗组各小鼠BALF中和脾培养上清中IL-4、IL-5、IL-13和IL-17细胞因子的含量均下降显着,IL-10和IFN-γ含量均升高显著,而血清中抗体IgE和IgG1的含量均下降显着,IgG2a含量升高显着,各数据间差异则具高度统计学意义(P<0.01);与FABP免疫治疗组进行比较,PI3K抑制剂组各小鼠BALF中和脾培养上清中IL-4、IL-5、IL-13和IL-17细胞因子的含量均升高显着,IL-10和IFN-γ含量均下降显著,而血清中抗体IgE和IgG1的含量均升高显着,IgG2a含量下降显着,各数据间差异则具高度统计学意义(P<0.01);PI3K抑制剂组与哮喘组进行比较,各数据间差异则不具统计学意义(P>0.05)。肺组织病理切片结果说明,与哮喘组进行比较,FABP免疫治疗组各小鼠肺部炎性症状均有很大程度上的改善,炎症细胞浸润现象也有较大程度上的减轻,各气道上皮的结构也较良好,哮喘症状明显缓解;与FABP免疫治疗组进行比较,PI3K抑制剂组各小鼠肺泡隔显着增宽,支气管管壁增厚,管壁间炎症细胞明显增多,腔内有分泌物,类似哮喘组症状。BALF中细胞计数结果说明,与哮喘组进行比较,FABP免疫治疗组各小鼠Total及EOS数均下降显着,各数据间差异则具高度统计学意义(P<0.01);与FABP免疫治疗组进行比较,PI3K抑制剂组各小鼠Total及EOS数均上升显着,各数据间差异则具高度统计学意义(P<0.01);PI3K抑制剂组与哮喘组进行比较,各数据间差异则不具统计学意义(P>0.05)。Western bloting检测肺组织信号蛋白及其磷酸化(Akt、p-Akt、IκB-a和p-IκB-a)情况结果说明,FABP免疫治疗组与哮喘组进行比较,p-Akt/Akt、p-IκB-a/β-actin的值均明显降低,IκB-a/β-actin的值则升高显着,各数据间差异则具高度统计学意义(P<0.01);PI3K抑制剂组与FABP免疫治疗组进行比较,p-Akt/Akt、p-IκB-a/β-actin的值均明显升高,IκB-a/β-actin的值则降低显着,各数据间差异则具高度统计学意义(P<0.01);PI3K抑制剂组与哮喘组进行比较,各数据间差异则不具统计学意义(P>0.05)。结论:成功构建了重组质粒pET-28a(+)-Blo t,并完成了目的蛋白FABP的大规模原核表达和纯化;利用表达的目的蛋白FABP对热带无爪螨粗制提取液敏化的哮喘小鼠进行免疫治疗,可在很大程度上改善小鼠的哮喘症状;蛋白疫苗FABP对哮喘小鼠进行特异性免疫治疗的分子作用机理很可能是通过调节分子信号通路PI3K/AKT/NF-κB来完成的,为后续因螨致哮喘的治疗提供新思路。(本文来源于《安徽理工大学》期刊2017-12-28）
胡梅,宋杨达,刘思雪,宋铱航,沈溪明[8]（2017）在《CCR5第一、二胞外环特异性结合的拮抗短肽对TNBS诱导SD大鼠结肠炎的治疗作用》一文中研究指出目的:研究C-C趋化因子受体5(CCR5)膜外第一、二胞外环(ECL1和ECL2)特异性结合的拮抗短肽对叁硝基苯磺酸(TNBS)诱导的结肠炎模型大鼠的治疗作用与机制。方法:采用100 mg/kg TNBS诱导结肠炎SD大鼠模型;用不同剂量的2条拮抗短肽(ECL1:25、35和45 mg/kg;ECL2:15、25和35 mg/kg)分别作用于模型大鼠,观察其对大鼠疾病活动指数(DAI)、结肠大体损伤指数(CMDI)和组织病理学改变的影响,采用real-time PCR和Western blot法分别检测结肠组织TNF-α和COX-2的mRNA与蛋白表达水平。结果:与模型组相比,有效剂量的ECL2拮抗短肽HY治疗组大鼠疾病活动程度、肠道溃疡及病理组织学损伤均有明显减轻,各评分指数差异具有统计学意义(P<0.05);TNF-α和COX-2的蛋白和mRNA表达水平均明显下降(P<0.05)。ECL1拮抗短肽GH作用的大鼠结肠炎症状评分及TNF-α和COX-2炎症因子表达无明显改变。结论:ECL2拮抗短肽可能通过下调结肠黏膜TNF-α和COX-2的表达来缓解TNBS诱导的SD大鼠结肠炎,而ECL1拮抗短肽的作用不明显。(本文来源于《中国病理生理杂志》期刊2017年05期）
陶宁[9]（2017）在《JAK2/STAT3信号通路在DCP-IhC-ProDer f1嵌合肽疫苗特异性免疫治疗中作用的探讨》一文中研究指出目的:构建编码DCP-IhC-ProDer f1嵌合基因的原核表达载体pET28a(+)-DCP-IhC-ProDer f1并进行大规模诱导表达和纯化,用JAK 2抑制剂AG-490阻断JAK2/STAT3信号通路,探讨用重组蛋白DCP-IhC-ProDer f1免疫治疗过敏性哮喘小鼠时对JAK2/STAT3信号通路的影响。方法:1、合成特异性DC细胞分子结合肽peptides 3(FYPSYHSTPQRP)、MHCⅡ伴随分子Ii的第1-110序列的基因片段以及粉尘螨Ⅰ类变应原ProDer f1中的前肽序列,采用分子生物学技术将该叁种基因片段连接形成DCP-IhC-ProDer f1基因片段,并将该基因片段插入到大肠杆菌表达载体pET28a(+)中,形成原核表达重组载体pET28a(+)-DCP-IhC-ProDer f1,最后通过限制性内切酶双酶切和基因测序的方法对其进行验证;2、将构建好的重组载体pET28a(+)-DCP-IhC-ProDer f1转入到大肠杆菌表达菌株E.coli BL21(DE3)中,先用小剂量诱导剂IPTG对重组基因进行诱导表达,探索出最佳表达条件后进行大规模表达和纯化;3、以粉尘螨粗提液为过敏原,构建螨性过敏性哮喘小鼠模型,以纯化的DCP-IhC-ProDer f1表达蛋白为疫苗,对哮喘小鼠进行特异性免疫治疗,其中一组在雾化前0.5h腹腔注射JAK2抑制剂AG-490。ELISA试剂盒检测支气管肺泡灌洗液中细胞因子IFN-γ、IL-10、IL-4和IL-17的水平和血清中Ig E和Ig G2a抗体水平;制作肺组织病理切片,观察肺组织病理变化;蛋白质印迹法(Western blot)检测肺组织全蛋白提取液中p-JAK2、p-STAT3的情况。结果:1、经限制性内切酶双酶切反应和测序结果显示,原核表达载体pET28a(+)-DCP-Ih C-ProDer f1构建成功;2、IPTG诱导剂终浓度为0.4mmol/L时可诱导E.coli BL21(DE3)pET28a(+)-DCP-Ih C-ProDer f1菌株表达出DCP-Ih C-ProDer f1蛋白,表达结果通过SDS-PAGE分析显示,随后进行了大规模诱导表达和纯化;3、用纯化的pET28a(+)-DCP-IhC-ProDer f1表达蛋白作为疫苗特异性免疫治疗哮喘小鼠,肺组织病理切片显示:特异性免疫治疗(SIT)组和抑制剂组小鼠肺组织炎症情况明显较哮喘组小鼠的炎症情况改善,炎性细胞明显减少;抑制剂组与治疗组之间无明显差异。ELISA试剂盒检测结果显示:SIT组和抑制剂组相较于哮喘组血清中抗体Ig E明显降低(P<0.05),而血清中Ig G2a抗体浓度显着较高(P<0.05);抑制剂组与SIT组无明显差异(P>0.05)。肺泡灌洗液中细胞因子IL-4和IL-17水平,SIT组和抑制剂组浓度低于哮喘组(P<0.05),SIT组和抑制剂组无明显差异(P>0.05)。肺泡灌洗液中细胞因子IFN-γ和IL-10水平,SIT组和抑制剂组明显高于哮喘组(P<0.05)。Western blot检测肺组织蛋白提取液结果显示:哮喘组中p-JAK2、p-STAT3表达明显量明显高于对照组(P<0.05),而治疗组和抑制剂组的表达明显较哮喘组减少(P<0.05)。结论:原核表达载体pET28a(+)-DCP-Ih C-ProDer f1构建成功,并成功对其进行了大规模表达和纯化;DCP-IhC-ProDer f1嵌合肽疫苗特异性免疫治疗哮喘小鼠效果良好,可能通过影响JAK2/STAT3信号通路发挥作用。(本文来源于《皖南医学院》期刊2017-03-01）
王乐,周豪[10]（2016）在《肝特异性单不饱和脂肪酸合成酶抑制剂在丙型肝炎治疗中的作用》一文中研究指出【据《Antiviral Res》2016年8月报道】题:肝特异性单不饱和脂肪酸合成酶抑制剂在丙型肝炎治疗中的作用(作者Nio Y等)近年来,直接抗病毒药物已成为治疗HCV感染非常有效的药物。然而,直接抗病毒药物的耐药性是亟待解决的问题。因为宿主因素参与了HCV复制,联合应用抑制宿主因素的药物被认为是减少直接抗病毒药物耐药(本文来源于《临床肝胆病杂志》期刊2016年10期）
特异性治疗作用论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
研究目的:用从噬菌体M13mp18中提取出来的长链单链DNA和相应的短链DNA制备出含有多个可修饰位点的DNA纳米管,通过修饰适配体C2NP,使得构建的DNA纳米管可以靶向淋巴瘤细胞,提高所载化学药阿霉素的抗肿瘤作用,降低毒副作用。通过调整C2NP的数量和间距,使其更好地发挥生物治疗作用,载药后可同时发挥C2NP的生物治疗作用和阿霉素的化学治疗作用,提高抗肿瘤效果。研究方法:用PCR仪将从噬菌体中提取出的两种M13mp18单链DNA与相应的短链DNA制备成螺旋的DNA纳米管和直形的DNA纳米管,通过延长链的方式将核酸适配体C2NP修饰到DNA纳米管结构上,制备出由不同数量和间距的C2NP修饰的可靶向淋巴瘤的DNA纳米管。通过琼脂糖凝胶电泳、透射电子显微镜和原子力显微镜等对DNA纳米管结构进行表征;DNA纳米管的载药量和体外释放用酶标仪测阿霉素的荧光强度来考察;琼脂糖凝胶电泳表征DNA纳米管在含10%胎牛血清培养基中的稳定性;载体材料和缓冲盐对人间变性大细胞淋巴瘤细胞K299的毒性、DNA纳米管载药系统对K299细胞的生物作用以及生物作用和化疗联合作用等采用CCK8法进行考察;用流式细胞仪考察K299细胞对载药DNA纳米管系统的定量摄取、载药DNA纳米管系统对K299细胞的凋亡、周期以及活性氧水平的影响;相关蛋白的表达量用Western Blot实验进行表征。研究结果:本研究成功构建了可靶向淋巴瘤细胞的DNA纳米管载药系统,将阿霉素载入到DNA纳米管中后能够提高阿霉素的稳定性;载药螺旋DNA纳米管和载药直形DNA纳米管的体外释放研究表明螺旋DNA纳米管对阿霉素有一定的缓释作用,而直形DNA纳米管对阿霉素无缓释作用;细胞实验结果显示,本研究所构建的DNA纳米管和缓冲液无细胞毒性。载入DNA纳米管中的阿霉素相比于游离阿霉素对K299细胞有更显着的增殖抑制作用,共同孵育4 h后,K299细胞对载药DNA纳米管组阿霉素的摄取量是游离阿霉素的2.37倍;当DNA纳米管上修饰30个C2NP且相邻之间的距离为6 nm时,对K299细胞的抑制率最为显着;生物治疗和化学治疗协同作用结果表明,载药以后,系统在增强阿霉素抗肿瘤作用的同时又发挥了生物治疗作用。载药DNA纳米管与K299细胞共同孵育48 h后,明显增强了细胞的晚期凋亡率,由游离阿霉素的37.7%提高到62.8%,主要通过阻滞S期和G_2期达到抑制细胞增殖,同时使细胞内的活性氧水平升高,进一步促进细胞凋亡。免疫印迹实验结果显示,修饰有一定数量和间距C2NP适配体的DNA纳米管载药系统可以诱导K299细胞中p53蛋白的表达增加。研究结论:本课题所构建的C2NP适配体修饰的DNA纳米管载药系统可以靶向到淋巴瘤细胞内,显着提高阿霉素的体外抗肿瘤作用,降低其毒副作用。并且C2NP修饰的载药系统可以同时发挥化学治疗作用和生物治疗作用,大大降低了用药的浓度。数量和间距可控的适配体修饰的DNA纳米载体为肿瘤的治疗提供了新思路。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
特异性治疗作用论文参考文献
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