Dechlorane603的毒性效应及分子机制研究

论文摘要

得克隆603（Dechlorane 603,Dec603）是一种氯代阻燃剂,广泛存在于各种环境和生物介质中,与目前广泛使用的阻燃剂得克隆（Dechlorane Plus,DP）以及得克隆602（Dechlorane 602,Dec602）结构类似,三者都具有持久性、生物富集性、生物放大性等特征。与DP相比,Dec603具有更强的生物富集能力,对人类健康和生态环境构成了潜在的威胁。本论文分别采用雌激素受体（Estrogen receptor,ER）阴性人乳腺癌细胞MDA-MB-231和ER阳性人乳腺癌细胞MCF-7进行Dec603体外（in vitro）暴露实验。在分析不同浓度Dec603对两种细胞活性影响的基础上,通过对ER及其介导的基因组途径和非基因途径的靶分子进行定量分析,探讨其毒性作用的分子机制。体外实验的结果表明Dec603具有类雌激素效应,10-6M Dec603可引起MCF-7细胞的增殖,且具有时间-和剂量-效应关系。在10-10M～10-6M范围内,Dec603不能导致MDA-MB-231细胞的增殖,说明Dec603引起的类雌激素效应主要通过ER介导。在机制研究中发现,Dec603暴露不仅可以使MCF-7细胞中ERα的mRNA和蛋白表达水平升高,还能够使ER介导调控的下游靶基因（c-myc、c-fos和cyclinD1）mRNA表达水平升高,说明Dec603可通过ER介导的经典基因组途径发挥类雌激素作用。此外,Dec603的暴露可导致MAPK/ERK通路中的级联分子ERK1/2和MEK的表达上调及磷酸化激活,说明Dec603可通过MAPK/ERK途径发挥类雌激素作用。本论文证明了环境相关浓度Dec603（10-6M）具有类雌激素效应,其作用机制主要通过上调ER的表达及其介导的基因组和非基因组途径发挥作用,这些结果将为Dec603的生物毒性和生态危害评价提供理论依据。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 绪论
•   1.1 Dec603的研究
•     1.1.1 Dec603的理化性质
•     1.1.2 Dec603在环境和生物介质中的存在水平
•     1.1.3 Dec603的毒理学研究
•     1.1.4 本课题组对得克隆系化合物毒性效应的研究
•   1.2 内分泌干扰物的研究进展
•     1.2.1 内分泌干扰物的概念
•     1.2.2 内分泌干扰物的性质和分类
•     1.2.3 内分泌干扰物的迁移转化
•     1.2.4 内分泌干扰物的效应
•     1.2.5 内分泌干扰物的作用特点
•     1.2.6 环境内分泌干扰物的作用机制
•   1.3 雌激素的机制研究
•     1.3.1 雌激素受体
•     1.3.2 雌激素受体介导的分子机制
•   1.4 本课题的目的及意义
• 2 材料与方法
•   2.1 实验材料
•   2.2 实验耗材及试剂
•     2.2.1 实验耗材
•     2.2.2 实验试剂
•   2.3 试验方法
•     2.3.1 细胞复苏
•     2.3.2 细胞培养
•     2.3.3 细胞冻存
•     2.3.4 细胞铺盘
•     2.3.5 细胞增殖效应检测
•     2.3.6 蛋白免疫印迹实验
•     2.3.7 实时荧光定量PCR
•     2.3.8 统计学分析
•   2.4 技术路线
• 3 结果与讨论
•   3.1 Dec603的类雌激素效应研究
•     3.1.1 Dec603暴露对MCF-7细胞增殖的剂量-效应关系
•     3.1.2 Dec603暴露对MCF-7细胞增殖的时间-效应关系
•     3.1.3 Dec603暴露对ER阴性的MDA-MB-231细胞活性的影响
•   3.2 Dec603类雌激素作用的分子机制研究
•     3.2.1 Dec603对雌激素受体表达的影响
•     3.2.2 Dec603对ER介导的基因组途径中靶基因表达的影响
•     3.2.3 Dec603对MAPK/ERK通路的影响
• 结论与展望
• 参考文献
• 致谢
• 作者简历及攻读硕士学位期间的科研成果

文章来源

类型: 硕士论文

作者: 王炜智

导师: 杭晓明

关键词: 类雌激素效应,雌激素受体,基因组途径,通路

来源: 大连海事大学

年度: 2019

分类: 基础科学,工程科技Ⅰ辑

专业: 生物学,环境科学与资源利用

单位: 大连海事大学

分类号: X171.5

DOI: 10.26989/d.cnki.gdlhu.2019.001517

总页数: 61

文件大小: 5068K

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