大鼠肝卵圆细胞GPC3表型亚群分离与鉴定

论文摘要

目的:分离纯化GPC3阳性卵圆细胞亚群,为深入探索原发性肝癌的分子发病机制奠定物质基础。方法:采用2-乙酰氨基芴结合三分之二肝切除术（2-AAF+2/3PH）构建大鼠肝卵圆细胞增殖模型,鉴定卵圆细胞标记蛋白-6（OV-6）、细胞角蛋白19（CK19）及磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（glypican-3,GPC3）的表达,通过酶消化结合Percoll梯度离心分离纯化卵圆细胞群,采用间接磁珠阳性技术进一步分选得到GPC3+/-卵圆细胞。结果:2-AAF（15mg/kg）/PH可成功诱导大鼠卵圆细胞增殖,模型组以术后第9～11天达增殖高峰,免疫组化能表达OV-6、CK19及GPC3三种抗原。两步酶消化法结合Percoll密度梯度离心及间接免疫磁珠分选技术所得卵圆细胞亚群OV-6、GPC3呈阳性表达。结论:2-AAF/PH可有效建立大鼠肝卵圆细胞增殖模型;通过间接免疫磁珠分选技术可分离纯化GPC3+卵圆细胞亚群,进一步证实GPC3为卵圆细胞的新型表面抗原。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 实验动物
•   1.2 主要试剂
•   1.3 动物分组及肝卵圆细胞增殖模型的建立
•   1.4 组织病理学检查及免疫组织化学染色
•   1.5 肝卵圆细胞的分离和培养
•   1.6 肝卵圆细胞GPC3阳性亚群的分选、培养及鉴定
•   1.7 统计学分析
• 2 结果
•   2.1 卵圆细胞增殖特点及鉴定
•   2.2 肝卵圆细胞的分离及体外培养
•   2.3 GPC3+/-肝卵圆细胞亚群的鉴定
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 周震,尹寿新,羊东晔

关键词: 肝卵圆细胞,肝癌,免疫磁珠分选

来源: 湖南师范大学学报(医学版) 2019年06期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 肿瘤学

单位: 长沙市第一医院消化内科,济南市人民医院消化内科,香港大学深圳医院消化及肝病科

分类号: R735.7

页码: 11-16

总页数: 6

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