FGFR2-IIIb D3胞外段抑制角质形成细胞的脂质合成

论文摘要

目的:探讨成纤维细胞生长因子受体2（FGFR2）-IIIb D3胞外段对角质形成细胞中脂质合成的抑制作用。方法:利用等温滴定量热（ITC）法和CCK-8法检测FGFR2-IIIb D3胞外段的生物特性,并利用real-time PCR、Western blot、流式细胞术和油红O染色法分析其对角质形成细胞HaCaT脂质合成的抑制作用。结果:（1）ITC、real-time PCR和CCK-8结果显示FGFR2-IIIb在HaCaT细胞中高表达,FGFR2-IIIb D3胞外段可与FGF7特异性结合,抑制HaCaT细胞活力;（2）Western blot结果显示在HaCaT细胞中FGF7可显著上调固醇调节元件结合蛋白1c（SREBP-1c）、脂肪酸合成酶（FAS）、乙酰辅酶A合成酶（ACS）、硬脂酰辅酶A脱饱和酶（SCD）和羟甲基戊二酰辅酶A还原酶（HMGCR） mRNA的表达及p-FGFR、p-AKT和SREBP-1蛋白的表达（P<0.01）,用FGFR2-IIIb D3胞外段和AKT抑制剂处理后可抑制它们的上调,且与FGF7组相比差异显著;（3）油红O染色法和流式细胞术结果显示,FGF7诱导后HaCaT细胞的脂质含量明显上调,用FGFR2-IIIb D3胞外段和AKT抑制剂处理后,脂质含量下调（P<0.01）。结论:FGFR2-IIIb D3胞外段竞争性地与FGF7结合,抑制FGFR2-IIIb的自体磷酸化,抑制下游PI3K-AKT信号通路,抑制SREBP-1c和下游脂质合成酶的表达,进而抑制角质形成细胞中脂质的合成。

论文目录

• 材 料 和 方 法
•   1 主要试剂
•   2 主要方法
•     2.1 等温滴定量热法 （isothermal titration calorimetry, ITC） 研究FGFR2-IIIb D3胞外段与FGF7的结合力
•     2.2 Real-time PCR检测 FGFR1、FGFR2-IIIc、FGFR2-IIIb、FGFR3、FGFR4、SREBP-1c、FAS、ACS、SCD和HMGCR的mRNA表达
•     2.3 Western blot法检测FGF7、AKT抑制剂和FGFR2-IIIb D3胞外段对HaCaT细胞的FGFR2、p-FGFR、AKT和p-AKT表达的影响
•     2.4 油红O染色检测FGF7、AKT抑制剂和FGFR2-IIIb D3胞外段对HaCaT细胞内脂质沉积的影响
•     2.5 流式细胞术定量检测FGF7诱导角质形成细胞脂质的合成作用
•   3 统计学分析
• 结 果
•   1 FGFR2-IIIb D3胞外段的生物特性分析
•     1.1 FGFR2-IIIb D3胞外段可与FGF7结合
•     1.2 FGFR2-IIIb在HaCaT细胞中高表达
•     1.3 FGFR2-IIIb D3胞外段抑制HaCaT细胞活力
•   2 FGFR2-IIIb D3胞外段对脂质合成通路的抑制作用
•     2.1 FGFR2-IIIb D3胞外段可抑制FGF7激活的SREBP-1c mRNA的表达
•     2.2 FGFR2-IIIb D3胞外段可抑制FGF7激活的脂质合成酶 （FAS、ACS、SCD和HMGCR） mRNA的表达
•     2.3 FGFR2-IIIb D3胞外段可下调FGF7激活的p-FGFR、p-AKT和SREBP-1的表达
•     2.4 FGFR2-IIIb D3胞外段可抑制FGF7激活的脂质合成
• 讨 论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 谢盈,刘鸽,汪炬

关键词: 胞外段,成纤维细胞生长因子,固醇调节元件结合蛋白,脂质合成,角质形成细胞

来源: 中国病理生理杂志 2019年08期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学,基础医学

单位: 暨南大学生物医药研究院

基金: 国家自然科学基金资助项目(No.81773330)

分类号: R329.2

页码: 1501-1507

总页数: 7

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