高产胞外多糖沙棘根瘤内生细菌的筛选、鉴定及其发酵条件优化

论文摘要

目的:从6株产胞外多糖的沙棘根瘤内生细菌中,筛选出高产胞外多糖的菌株,并对其进行鉴定和发酵条件优化。方法:利用苯酚-硫酸法联合DNS法测定菌株胞外多糖产量,筛选高产胞外多糖菌株;利用形态学观察、生理生化特征及16S rRNA基因序列分析法对高产胞外多糖菌株进行鉴定;利用单因素实验法优化产多糖的发酵培养基与发酵条件,并利用正交实验法进一步优化培养基中蔗糖、KNO3、KH2PO4的最适添加量。结果:筛选得到一株高产胞外多糖菌株TT207,鉴定为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。经条件优化,确定其高产胞外多糖的最优培养基组分为蔗糖50 g/L,KNO3 10 g/L,KH2PO4 8 g/L;最佳发酵条件为:培养时间48 h,培养温度34℃,初始pH6.5,接种量4%,装液量70 mL/250 mL,摇床转速140 r/min。利用优化后的发酵条件,菌株胞外多糖产量提高了6.04倍。结论:高产胞外多糖菌株枯草芽孢杆菌TT207在最优发酵条件下,胞外多糖产量达到12.39 mg/mL,是一株具有开发潜力的胞外多糖生产菌株。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料与仪器
•   1.2 实验方法
•     1.2.1 培养基配制
•     1.2.2 菌株的活化
•     1.2.3 菌株胞外多糖的提取
•     1.2.4 菌株胞外多糖产量的测定
•     1.2.5 菌株胞外多糖产量的计算
•     1.2.6 高产胞外多糖菌株的筛选
•     1.2.7 菌株的鉴定
•       1.2.7.1 形态学鉴定
•       1.2.7.2 生理生化鉴定
•       1.2.7.3 16S rRNA序列分析及系统发育树的构建
•     1.2.8 最优发酵培养基的筛选
•     1.2.9 菌株的生长曲线及产糖曲线的测定
•     1.2.10 发酵条件的优化
•     1.2.11 发酵培养基组分的优化
•     1.2.12 正交实验设计
•   1.3 数据处理
• 2 结果与分析
•   2.1 高产胞外多糖菌株的筛选
•     2.1.1 葡萄糖标准曲线的测定
•     2.1.2 高产菌株的筛选
•   2.2 高产胞外多糖菌株的鉴定
•     2.2.1 菌株TT207的形态学特征
•     2.2.2 菌株TT207的生理生化特征
•     2.2.3 菌株TT207的分子生物学鉴定
•   2.3 最优发酵培养基的筛选
•   2.4 菌株TT207的生长曲线及胞外多糖产量曲线
•   2.5 发酵条件的优化
•     2.5.1 温度对EPS产量的影响
•     2.5.2 初始pH对EPS产量的影响
•     2.5.3 接种量对EPS产量的影响
•     2.5.4 装瓶量对EPS产量的影响
•     2.5.5 摇床转速对EPS产量的影响
•   2.6 发酵培养基组分的优化
•     2.6.1 碳源种类及其添加量对EPS
•     2.6.2 氮源种类及其添加量对EPS产量的影响
•     2.6.3 无机盐种类及其添加量对EPS产量的影响
•   2.7 正交实验结果
•     2.7.1 方差分析
•     2.7.2 验证实验
• 3 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 张爱梅,于杰,韩雪英,孔维宝,牛世全,朱学泰

关键词: 沙棘,根瘤,内生细菌,胞外多糖,发酵条件

来源: 食品工业科技 2019年19期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学

专业: 生物学,有机化工,一般化学工业

单位: 西北师范大学生命科学学院

基金: 国家自然科学基金(31360005),2018年陇原青年创新创业人才(团队)项目

分类号: TQ920.6;TQ281

DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2019.19.014

页码: 81-88+93

总页数: 9

文件大小: 2207K

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