应用SPR技术基于NA抑制剂的流感病毒快速检测

应用SPR技术基于NA抑制剂的流感病毒快速检测

论文摘要

自从1918年爆发的西班牙流感到现在,人类与流感病毒的斗争已经历时一个世纪了。在这个过程中人们往往利用流感病毒表面覆盖拷贝数较多且靶点是小分子的神经氨酸酶(NA)作为预防和抑制流感病毒的靶点,同时对于神经氨酸酶的抑制剂竞争性的抑制神经氨酸酶对糖苷键的水解需要在48小时内服用药物才会更有效。因此快速检测流感的方法对于流感的预防和和监控有着举足轻重的作用。目前现存的流感的检测方法主要有RT-PCR方法、RIDT(快速抗原检测)技术和NASBA(核酸序列扩增法)方法,虽然RT-PCR方法检测限很低,但是操作复杂;RIDT(快速抗原检测)技术虽然操作简单,但是误差大约在20%左右;NASBA(核酸序列扩增法)方法能快速检测到流感病毒但是由于技术问题无法大规模使用。并且这些方法都无法实现快速、实时、无需标记的检测要求。开发准确快速的检测方法迫在眉睫。表面等离子体共振(SPR)生物传感器已经被广泛的应用蛋白相互作用和病原检测等多个研究领域。其优点就是可以实现快速、实时、无标签的检测过程,因此也可以应用到流感病毒的检测中。本课题应用表面等离子共振技术基于临床上NA的抑制剂奥司他韦和扎那米韦与流感病毒相互作用来快速的检测流感病毒。首先我们选用能与生物素(biotin)特异性结合的SA(链霉亲和素)芯片,以奥司他韦为原料合成了生物素化的奥司他韦将其偶练到SPR传感器的芯片上用于检测流感病毒。实验结果表明使用小分子生物素化的奥司他韦和用适配体、抗体来检测流感病毒的的检测限(LOD)相近;大约是0.125HAU。接着我们以唾液酸为原料制备了扎那米韦包被的纳米晶棒来降低检测限,实验结果表明利用扎那米韦包被的纳米金棒来检测流感病毒的检测限大约是0.0625 HAU。因此我们得出结论利用小分子生物素化奥司他韦不仅可以准确的检测到流感病毒而且检测过程大约在20分钟左右。同时使用扎那米韦包被的纳米金棒能大大降低检测限。由于选用的靶点NA存在于多种类型的流感病毒中,所以使用该方法可以检测到不同类型的流感病毒。本方法为生物传感器快速检测流感病毒提供了技术支持,为其他类流感病毒的快速检测提供了新手段。

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文章来源

类型: 国内会议

作者: 李伟,杨杨

关键词: 流感,表面等离子体共振,生物化奥司他韦,纳米金棒

来源: 中国化学会第三届全国糖化学会议 2019-09-21

年度: 2019

分类: 基础科学,工程科技Ⅰ辑,医药卫生科技

专业: 生物学,材料科学,基础医学

单位: 天津科技大学生物工程学院

分类号: R373.13;TB383.1

DOI: 10.26914/c.cnkihy.2019.077817

页码: 110

总页数: 1

文件大小: 503k

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