5-氟尿嘧啶对结肠癌干细胞干性和增殖的影响及相关机制

论文摘要

目的探讨5-氟尿嘧啶（5-FU）抑制结肠癌干细胞（CCSCs）干性对结肠癌细胞生长的影响及相关分子机制。方法将慢病毒介导的p53特异性短发来RNA（shRNA）转导入CCSCs,构建敲低p53表达的shRNA-p53-CCSCs细胞系。然后将正常CCSCs和shRNA-p53-CCSCs分别分成以下处理组:阴性对照组、DMSO组、舒林酸组和5-FU组,舒林酸组细胞经10μg/ml舒林酸处理,5-FU组细胞经2.5μg/ml 5-FU处理,然后通过BrdU检测试剂盒检测正常CCSCs和shRNA-p53-CCSCs活性,末端转移酶dUTP切口末端标记检测细胞凋亡情况,球体形成实验检测细胞干性变化,Western印迹检测处理后细胞中线粒体凋亡途径相关蛋白Bax/Bcl-2和细胞色素c,β-连环蛋白及其下游靶蛋白c-Myc和cyclinD1表达情况。结果与阴性对照组相比,5-FU组正常CCSCs增殖速率下降了52%,凋亡率为31%（P<0.05）,而shRNA-p53-CCSCs增殖速率下降了73%,凋亡率为42%（P<0.05）,舒林酸组正常CCSCs增殖速率下降了47%（P<0.05）。球体形成实验检测结果表明,5-FU和舒林酸均显著抑制CCSCs球体形成,且与阴性对照组相比,5-FU和舒林酸组球体体积显著下降（P<0.05）,5-FU处理后正常CCSCs中Bax/Bcl-2比例升高约4倍,正常CCSCs与shRNA-p53-CCSCs中细胞色素c表达分别升高约2.8倍,2.5倍,β-连环蛋白在正常CCSCs的胞质和胞核中分别下降75%,73%,在shRNA-p53-CCSCs中分别下降81%,80%,而c-Myc和cyclinD1在上述两种细胞中的表达分别下降83%,52%和47%,53%。结论 5-FU能通过抑制Wnt/β-连环蛋白信号通路并上调线粒体介导的细胞凋亡抑制CCSCs增殖并促进细胞凋亡,具有潜在的抗肿瘤性。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 CCSCs
•   1.2 主要仪器及试剂
•   1.3 介导p53敲低表达的重组慢病毒短发夹RNA（shRNA）载体
•   1.4 细胞增殖检测
•   1.5 末端转移酶dUTP切口末端标记检测
•   1.6 球体形成实验
•   1.7 Western印迹检测
•   1.8 统计学方法
• 2 结 果
•   2.1 5-FU抑制CCSCs增殖并诱导凋亡
•   2.2 5-FU抑制CCSCs球体形成能力
•   2.3 5-FU促进线粒体介导的凋亡途径相关蛋白Bax/Bcl-2和细胞色素c表达
•   2.4 5-FU抑制Wnt信号通路活化
• 3 讨 论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 蔡尚党,蔡满地,娄宁,郭艳萍,殷涛

关键词: 结肠癌干细胞,氟尿嘧啶,连环蛋白

来源: 中国老年学杂志 2019年24期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 肿瘤学

单位: 河南省中医院肛肠科,河南大学医学院临床医学系,中山大学附属肿瘤医院ICU,河南省人民医院病理科,华中科技大学同济医学院附属协和医院胰腺病研究所

基金: 国家自然科学基金(No.81372665)

分类号: R735.35

页码: 6055-6059

总页数: 5

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