导读:本文包含了种属特异性识别论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:特异性,位点,论文,色氨酰,tRNA。
种属特异性识别论文文献综述
贾捷[1]（2004）在《Ic类氨酰tRNA合成酶对tRNA的种属特异性识别》一文中研究指出在枯草杆菌tRNATrp色氨酰化反应中,缺失108-122位残基的TrpRS突变体丧失了44%的活力,缺失234-238位残基的突变体丧失了80%的活力。凝胶阻滞实验显示缺失枯草杆菌TrpRS的108-122位残基及234-238位残基组成的肽段后,TrpRS会分别丧失与tRNATrp的氨基酸接受茎和反密码环相结合的能力。实验表明由108-122位残基及234-238位残基组成的肽段对于枯草杆菌tRNATrp的识别及催化是非常重要的。Trp结合口袋旁边的两个氨基酸残基K149和E153在不同种属的TrpRS中显示出进化差异。E153G的突变会导致TrpRS在缺少tRNATrp时无法正常地催化Trp的活化。通过转变K149和E153的电性,我们成功地转变了枯草杆菌TrpRS原来的种属特异性。其中WHBA和E153K甚至更倾向于选择人源tRNATrp作为氨酰化底物,而不是本来对应的枯草杆菌的tRNATrp。我们对目前已知的所有Ic类氨酰tRNA合成酶和tRNA基因的序列进行了同源性分析。结果表明在氨基酸结合口袋旁边存在着具有种属差异特质的保守残基,它们与相应tRNA上的识别元件表现出明显的共进化特征。通过改变这些保守残基侧链基团的电性,我们成功的扭转了TrpRS对tRNATrp识别的种属特异性。当tRNATrp的识别元件发生相应变化后,TrpRS突变体的氨酰化活力又会恢复到野生型TrpRS的水平。实验证明在Ic类氨酰tRNA合成酶中存在着负责相应tRNA识别的种属特异性元件,它们是遗传密码的延续。此外我们还对枯草杆菌和人TrpRS和TyrRS中的tRNA识别位点进行了预测,认为它们是通过由两个螺旋组成的大沟来识别和结合相应tRNA的氨基酸接受茎末端。通过RT-PCR,我们从人肺巨细胞癌菌株95D的总RNA中克隆到末端携带6个组氨酸残基的重组人酪氨酰tRNA合成酶的基因(tyrS)。通过测序鉴定后,tyrS被亚克隆到表达载体pET-24a(+),然后转化到大肠杆菌BL21-CodonPlus-RIL中。在IPTG诱导下,人酪氨酰tRNA合成酶在表达的总蛋白中TyrRS的含量达到24%。重组人TyrRS可以利用Ni2+柱亲和层析的方法快速方便地被一步纯化。与其它真核TyrRS的动力学行为相比,蛋白质C末端添加的6个组氨酸残基对于人TyrRS的活力基本没有影响。(本文来源于《中国科学院研究生院（上海生命科学研究院）》期刊2004-03-01）
种属特异性识别论文开题报告
种属特异性识别论文参考文献
[1].贾捷.Ic类氨酰tRNA合成酶对tRNA的种属特异性识别[D].中国科学院研究生院（上海生命科学研究院）.2004
论文知识图
