导读:本文包含了逆转运论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:胆固醇,细胞,泡沫,脂蛋白,苏木,动脉,高密度。
逆转运论文文献综述
戎光,周庆兵,李婧,梅俊,金宇[1]（2019）在《化浊通脉方对ox-LDL诱导的RAW264.7来源泡沫细胞胆固醇逆转运相关基因表达作用研究》一文中研究指出目的:观察化浊通脉方对RAW264.7源性泡沫细胞胆固醇逆转运相关基因的影响。方法:ox-LDL与RAW264.7细胞共同孵育形成泡沫细胞;CCK-8试剂盒检测不同浓度化浊通脉方对泡沫细胞的增殖抑制情况;总胆固醇试剂盒检测化浊通脉方的降脂效果;运用荧光定量PCR检测胆固醇代谢相关基因ABCA1、ABCG1、SR-BI以及PPAR-γ的表达变化。结果:大剂量化浊通脉方能够降低细胞总胆固醇;能够提高ABCA1、SR-BI基因表达,降低PPAR-γ基因表达。结论:化浊通脉方可能通过提高泡沫细胞中胆固醇逆转运关键基因ABCA1、SR-BI实现抗AS效应。(本文来源于《陕西中医》期刊2019年12期）
于海睿[2]（2019）在《苏木提取物对动脉粥样硬化模型大鼠胆固醇逆转运的影响》一文中研究指出目的:观察苏木提取物对体内外胆固醇逆转运及相关分子信号通路的影响,探讨苏木提取物抗动脉粥样硬化的作用机制。方法:实验一:人THP-1单核细胞PMA诱导分化为巨噬细胞,应用50μg/ml ox-LDL和0.2μCi/ml ~3H胆固醇孵育细胞,应用不同浓度和不同作用时间的苏木提取物含药血清处理细胞。油红O染色鉴定泡沫细胞的形态;HPLC检测细胞内胆固醇水平;闪烁计数法检测细胞内胆固醇流出率。实验二:40只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、苏木组、辛伐他汀组,每组10只。空白组给予普通饲料喂养,其余3组给予高脂饲料及腹腔注射维生素D_3复制动脉粥样硬化模型,模型复制时间12周。第13周空白组及模型组大鼠给予等体积羧甲基纤维素钠溶液灌胃;苏木组给予苏木提取物混悬剂灌胃;辛伐他汀组给予辛伐他汀混悬剂灌胃,连续给药4周。第16周末,大鼠麻醉称重取材,HE染色观察大鼠主动脉及肝脏形态学变化;全自动生化仪测定血清TG、TC、LDL-C、HDL-C水平;ELISA法检测血清IFN-γ、TNF-α、IL-6水平;免疫组化法观察大鼠腹主动脉CD40L蛋白表达;Western Blot、RT-PCR法检测大鼠肝脏PPARγ、LXRα、ABCA1、Cav-1、SR-BI蛋白及基因表达。结果:(1)苏木提取物含药血清呈浓度、时间依赖性促进THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇流出,降低细胞内TC、FC、CE含量。(2)HE染色显示苏木提取物能够减少血管壁脂质沉积,同时减轻肝脏细胞炎症肿胀及细胞内脂滴。(3)血清TC、TG、LDL-C、HDL-C结果:与空白组比较,模型组大鼠血清TC、TG、LDL-C水平升高(P<0.01);与模型组比较,苏木组、辛伐他汀组大鼠血清TC、TG水平降低(P<0.05,P<0.01)。(4)血清IF N-γ、TNF-α、IL-6结果:与空白组比较,模型组大鼠血清IFN-γ、TNF-α、IL-6水平增加(P<0.01),与模型组比较,苏木组、辛伐他汀组大鼠血清IFN-γ、TNF-α、IL-6水平降低(P<0.01)。(5)CD40L免疫组化结果:与空白组比较,模型组大鼠腹主动脉CD40L蛋白表达强度增加(P<0.01);与模型组比较,苏木组、辛伐他汀组大鼠腹主动脉CD40L蛋白表达下调(P<0.01)。(6)Western Blot及PCR结果:与空白组比较,模型组大鼠肝脏组织中PPARγ、LXRα、ABCA1、Cav-1、SR-BI蛋白及基因表达下调(P<0.01),与模型组比较,苏木组、辛伐他汀组大鼠肝脏组织中PPARγ、L XRα、ABCA1、Cav-1、SR-BI蛋白及基因表达上调(P<0.05,P<0.01)。结论:1.苏木提取物含药血清呈浓度和时间依赖性促进细胞内胆固醇流出;2.苏木提取物能够减轻动脉粥样硬化模型大鼠腹主动脉及肝脏病理损伤;3.苏木提取物能够降低动脉粥样硬化模型大鼠血清TC、TG、IFN-γ、TNF-α、IL-6水平,下调CD40L蛋白表达,抑制炎症反应;4.苏木提取物促进胆固醇逆转运发挥抗动脉粥样硬化的作用,部分机制可能与上调肝脏组织中PPARγ、LXRα、ABCA1、Cav-1、SR-BI蛋白及基因的表达相关。(本文来源于《黑龙江中医药大学》期刊2019-06-01）
周庆兵,戎光,李靖,梅俊,金宇[3]（2019）在《化浊通脉方对ox-LDL诱导的RAW264.7来源泡沫细胞胆固醇逆转运相关基因的表达作用研究》一文中研究指出目的观察化浊通脉方对ox-LDL诱导的RAW264.7来源泡沫细胞胆固醇逆转运相关基因的表达作用。方法以ox-LDL诱导RAW264.7细胞形成泡沫细胞模型;CCK-8法检测不同浓度化浊通脉方对泡沫细胞的增殖抑制情况;将细胞分为4组,分别为模型组(80μg/mL ox-LDL)、小剂量化浊通脉方组(80μg/mL ox-LDL+化浊通脉方300倍稀释)、中剂量化浊通脉方组(80μg/mL ox-LDL+化浊通脉方120倍稀释)、大剂量化浊通脉方组(80μg/mL ox-LDL+化浊通脉方60倍稀释),处理24h后收集细胞,总胆固醇试剂盒检测化浊通脉方的降脂效应;同时提取RNA,运用荧光定量PCR检测胆固醇代谢相关基因ABCA1、ABCG1、SR-BI以及PPAR-γ的表达变化。结果油红O染色显示,以80μg/mL ox-LDL处理的RAW264.7细胞泡沫化明显;CCK-8法显示化浊通脉方对RAW264.7来源泡沫细胞具有显着的抑制作用;胆固醇检测发现,大剂量化浊通脉能够降低细胞总胆固醇(P=0.045),小剂量及中剂量无降脂作用。(P>0.05)。RT-PCR检测显示,化浊通脉方能够提高ABCA1、SR-BI基因表达(P=0.044;P=0.0028),降低PPAR-γ表达(P=0.0006),对ABCG1基因表达改变不明显(P=0.26)。结论化浊通脉方可能通过提高泡沫细胞中胆固醇逆转运关键基因ABCA1、SR-BI实现抗AS效应。(本文来源于《中国中西医结合学会第八届虚证与老年医学专业委员会、中国老年学和老年医学学会中西医结合分会、江苏省中医药学会老年医学专业委员会2019年学术年会论文集》期刊2019-05-31）
刘季晨[4]（2019）在《LCK-ZAP70对胆固醇逆转运及动脉粥样硬化的影响和机制研究》一文中研究指出研究背景动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)危害着人类的健康,然而其发病的机制现在仍不十分明确,现在普遍认为认为,炎症免疫反应在AS的发病中起着重要作用,T淋巴细胞对AS有十分重要的作用,在AS的早期就有T淋巴细胞的浸润,它可以识别来自人类动脉斑块的蛋白抗原,如氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)等,提呈并分泌大量炎症因子,诱导巨噬细胞等泡沫化,多项研究证实,抑制T淋巴细胞活化可减少AS的发生。LCK(Lymphocyte-specific protein tyrosine kinase)是一种在T细胞细胞质里表达的一种酪氨酸激酶,是Src家族的一员,在T细胞受体识别抗原后信号级联反应的维持中起到核心的作用,对T细胞增殖、分化和激活有着重要作用。PP2是一种LCK抑制剂,能够有效的抑制T细胞激活,减少炎症免疫反应。我们的前期工作发现:使用siRNA对T细胞受体(TCR)通路的关键蛋白LCK进行抑制,发现T细胞的胆固醇流出率和转运相关蛋白表达明显提高,细胞内胆固醇酯明显减少,炎症因子的分泌等亦明显减少,但是这些研究仅限于细胞层面,LCK对动物AS斑块形成的作用及机制尚不明确,本研究拟在动物及细胞层面明确抑制LCK对AS斑块形成及稳定性等的影响,并且探索抑制LCK对影响AS的T细胞分化和HDL功能的作用,机制上探究LCK下游影响T细胞分化和胆固醇逆转运(RCT)的效应通路,明确LCK对AS的具体作用和机制,为AS的治疗提供新的方向。研究方法在动物层面,使用不同浓度的LCK抑制剂PP2经腹腔注射,干预普食和高脂的ApoE-/-小鼠,使用油红O染色、Masson叁色染色、免疫荧光、流式细胞学、Elisa法、RT-PCR和Western Blot等实验方法,检测PP2抑制LCK后对ApoE-/-小鼠AS斑块形成、脂质含量和斑块稳定性的影响,机制探索LCK对影响AS的T细胞分化和HDL功能的影响。在细胞层而,采用Jurkat细胞和ZAP70缺失的细胞株使用[3H]胆固醇、RT-PCR和Western Blot等实验方法,探索LCK下游ZAP70对细胞胆固醇转出率的影响,使用ERK、JNK、p38MAPK特异性抑制剂,明确LCK-ZAP70影响胆固醇流出的具体机制。研究结果我们的研究发现:1.PP2可以浓度依赖的减少主动脉斑块形成,增加斑块稳定性;2.PP2可以浓度依赖的降低血清IFN-y和TNF-α的分泌;3.PP2可以浓度依赖的减少主动脉根部CD4+T细胞浸润,调节脾脏T细胞分化,减少Thl细胞,增加Treg细胞;4.PP2可以浓度依赖的增加HDL的胆固醇转出率,上调胆固醇转运相关蛋白表达;5.PP2可以抑制与T细胞分化相关的PI3K/AKT/mTOR通路的激活,抑制ZAP70磷酸化。6.LCK下游的ZAP70缺失可以升高T细胞胆固醇流出率,上调胆固醇相关蛋白的表达;7.ZAP70缺失可以抑制炎症因子IL-2、IL-6、IFN-γ和TNF-α的分泌,抑制ERK、JNK、p38 MAPK的磷酸化;8.ERK、JNK、p38 MAPK抑制剂可以抑制IL-6、IFN-y和TNF-α的分泌,但仅有ERK抑制剂可以升高T细胞胆固醇流出率,上调胆固醇相关蛋白的表达;9.ERK抑制剂可以促进LXR-α和ABCG1启动子上的LXRE-A结合,从而促进ABCG1的表达。研究结论LCK抑制剂PP2可能通过抑制PI3K/AKT/mTOR通路活化,调节T细胞分化,减少Th1/Treg 比值;且另一方面通过LCK下游ZAP70-ERK通路,上调胆固醇转运相关蛋白,增加HDL的胆固醇逆转运的功能,从而发挥抗AS的作用。(本文来源于《南方医科大学》期刊2019-05-17）
梅俊[5]（2019）在《从胆固醇逆转运途径探讨芎芍胶囊抗动脉粥样硬化机制研究》一文中研究指出目的:从胆固醇逆转运途径探讨芎芍胶囊抗动脉粥样硬化机制研究方法:(1)将芎芍胶囊中川芎、赤芍分别导入BATMAN-TCM平台进行靶标基因预测及分析;而后通过计算“芍胶囊化合物—靶标”与“已知药物—靶标”之间的相似性,并对潜在的药物靶标相互作用进行打分,并以score≥20的靶标作为潜在的靶标基因,基于功能条目、生物学通路、疾病的富集分析,考察中药的潜在靶标可能具有的生物学功能及参与的生物学通路,构建“中药组成化合物-靶标-生物学通路-疾病”的关联网络。(2)采用80 mg/L氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导巨噬细胞24 h,建立RAW264.7源性泡沫细胞模型,添加大鼠含药血清,将细胞分为对照组(正常巨噬细胞)、模型组(80mg/L ox-LDL)、正常血清组(10%正常大鼠血清)及正常血清对照组(80mg/L ox-LDL+10%正常大鼠血清)、辛伐他汀组(80mg/L ox-LDL+10%辛伐他汀血清)、芎芍复方血清低剂量组(80mg/L ox-LDL+10%芎芍复方血清)、芎芍复方血清高剂量组(80mg/L ox-LDL+20%芎芍复方血清),通过油红“O”染色观察细胞内胆固醇分布;以胆固醇检测试剂盒检测正常血清、辛伐他汀血清、芎芍复方血清及各组细胞内总胆固醇(TC)及游离胆固醇(FC)含量。(3)以CCK-8检测不同浓度梯度川芎嗪、芍药苷对泡沫细胞增殖活力的影响,并根据不同配伍用药对泡沫细胞胆固醇外流的影响,确定最佳配伍比例,其后将RAW264.7细胞分为5组:对照组、模型组、川芎嗪组、芍药苷组、联合组接种于96孔板上,予不同药物干预,以油红O染色观察芎芍胶囊有效组分干预泡沫细胞后胞内脂质的分布。将RAW264.7细胞分为6组:对照组、模型组、apoA1组、川芎嗪组、芍药苷组、联合药物组,分别予不同药物干预,以荧光标记胆固醇观察芎芍胶囊有效组分促泡沫细胞荧光标记胆固醇流出能力;将RAW264.7细胞分为5组:对照组、模型组、川芎嗪组、芍药苷组、联合组接种于60mm培养皿,予不同药物干预,收集细胞,分别以western blot、PCR观察其芎芍胶囊有效组分对泡沫细胞过氧化物酶体增殖激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor gamma,PPARy)、肝X受体α(liver X receptor alpha,LXRα)、叁磷酸腺苷结合盒转运体A1(adenosine triphosphate binding cassette transporter A1,ABCA1)、叁磷酸腺苷结合盒转运体G1(adenosine triphosphate binding cassette transporter G1,ABCG1)、B族1型清道夫受体(scavenger receptor B1,SR-B1)等RCT相关蛋白表达的影响;以Elisa试剂盒检测细胞培养液中肿瘤坏死因子-α(tumor necrotic factor alpha,TNF-α)、白介素-1β(interleukin l beta,IL-1β)、单核细胞趋化因子-1(monocyte chemokine-1,MCP-1)的含量,观察芎芍胶囊有效组分对致AS细胞因子的作用。(4)采用DIA分析技术对芎芍胶囊有效组分干预后的RAW264.7源性泡沫细胞蛋白质的动态变化进行检测,通过与模型组进行比较,筛选出与脂质代谢相关的差异蛋白。结果:(1)以芎芍胶囊包含的110种化合物在BATMAN-TCM平台获取靶标基因共有965个,芎芍胶囊有多个组分参与调节PPARy、ABCA1、ABCG1、apoAl等相关RCT蛋白的表达,并影响CCL2/MCP-1、IL-lβ、TNF-α、CD36的代谢。芎芍胶囊药理作用共涉及AS相关的基因靶点13个,包括3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGCR)、人血红素氧合酶-1(HMOX1)、花生四烯酸-15-脂加氧酶(ALOX15)、微粒体甘油叁酸酯转移蛋白(MTTP)、过氧化物酶体增殖因子活化受体y(PPARG)、肝X受体α(NR1H3)、过氧化物酶体增殖因子活化受体δ(PPARD)、单核细胞趋化因子-1(CCL2)、花生四烯酸盐15-脂氧合酶B型(ALOX15B)、羧酸酯酶1(CES1)、核受体亚家族1 H组成员2(NR1H2)、凝血因子II(F2)、雌激素受体1(ESR1),涉及到胆固醇跨膜转运、凝血反应、胆固醇酯代谢、炎症反应、脂质氧化修饰、细胞粘附等多个环节。(2)模型组细胞形态及染色结果符合泡沫细胞标准;正常血清组、正常血清对照组、辛伐他汀血清组、芎芍复方血清组细胞内均含有大量脂滴,且各组细胞内脂质着色无明显差异。与正常血清组对比较,辛伐他汀血清、芎芍复方血清组中TC差异均无统计学意义(P>0.05),辛伐他汀血清组FC含量升高(P<0.05),芎芍复方血清组FC含量降低(P<0.05)。与对照组比较,模型组、正常血清组、正常血清对照组、辛伐他汀血清组、芎芍复方血清高剂量组TC、FC含量均增加(P<0.05),芎芍复方血清低剂量组TC含量差异无明显增加(P>0.05),FC含量增加(P<0.05)。与模型组比较,芎芍复方血清低剂量组TC含量降低(P<0.05),FC含量差异无统计学意义(P>0.05);正常血清组、正常血清对照组、辛伐他汀血清组、芎芍复方血清高剂量组TC、FC浓度差异无统计学意义(P>0.05)。与正常血清对照组比较,芎芍复方血清组TC含量降低(P<0.05),FC含量差异无统计学意义(P>0.05),辛伐他汀血清组、芎芍复方血清高剂量组TC、FC浓度差异无统计学意义(P>0.05)。(3)与对照组、模型组相比,不同浓度川芎嗪、芍药苷对泡沫细胞增殖活力的影响组间无统计学差异(P>0.05);与对照组相比,模型组TC、FC含量显着升高(P<0.05);与模型组相比,川芎嗪40mg/L、川芎嗪80mg/L组TC含量明显下降(P<0.05),不同川芎嗪浓度(10、20、40 mg/L)组、川芎嗉40mg/L加载不同浓度芍药苷(5、10、20、40、80mg/L)组TC含量显着下降(P<0.05),川芎嗪40mg/L组、川芎嗪40mg/L加载不同浓度芍药苷(5、10、20、40、80mg/L)组FC含量有所下降(P<0.05),其余各组FC含量无明显下降(P>0.05)。油红O染色可见对照组细胞无着色;与对照组相比较,模型组细胞形态呈类圆形,细胞形态呈空泡样,胞内可见大量红色脂滴,符合泡沫细胞标准;与模型组比较,川芎嗪组、芍药苷组、联合药物组细胞内沉积脂质明显减少,川芎嗪组、芍药苷组可见少量红色脂滴,联合药物组未见明显脂质着色;与对照组相比,模型组TNF-α、IL-lβ、MCP-1浓度明显升高(P<0.05)。与模型组比较,川芎嗪组IL-lβ、MCP-1浓度明显下降(P<0.05);芍药苷组IL-lβ浓度有所下降(P<0.05);联合药物组TNF-α、IL-lβ、MCP-1浓度明显下降(P<0.05)。对照组未见荧光胆固醇沉积,与对照组比较,模型组可见大量荧光胆固醇蓄积,apoAl组、川芎嗪组、芍药苷组、联合药物组细胞内荧光胆固醇有不同程度的下降,其中联合药物明显下降。与模型组比较,apoA1组、川芎嗪组、芍药苷组、联合药物组胆固醇流出率均明显增加(P<0.05);与apoA1组比较,川芎嗪组、联合药物组胆固醇流出率明显增加(P<0.05)。与对照组相比,模型组SR-B1蛋白表达有所增加(P<0.05);川芎嗪组PPARy蛋白表达明显下降(P<0.05);芍药苷组SR-B1蛋白表达有所增加(P<0.05);联合药物组ABCA1、ABCGI、SR-B1、PPARy、LXRα蛋白表达均显著增加(P<0.05)。与模型组比较,川芎嗪组SR-B1蛋白表达明显下降(P<0.05);联合药物组ABCA1、ABCG1、PPARγ、LXRα蛋白表达明显增加(P<0.05)。与对照组相比,模型组PPARy、LXRαmRNA明显下降(_P<0.05);联合药物组ABCA1、ABCG1、PPARγ、LXRαmRNA表达均显着增加(P<0.05),SR-B1mRNA表达无统计学差异(P>0.05)。与模型组比较,川芎嗪组ABCA1、SR-BlmRNA表达显着增加(P<0.05),联合药物组ABCA1、ABCG1、SR-B1、PPARγ、LXRαmRNA表达明显增加(P<0.05)。(4)以DIA技术对9个样本进行分析,将模型组与对照组比较、芎芍组与模型组比较,结果发现两比较组差异蛋白各有324、142个,模型/对照组KEGG通路主要集中在DNA复制、戊糖和葡萄糖醛酸盐、AMPK浸润途径、脂肪酸代谢、谷胱甘肽代谢、碳代谢、癌症中的中心碳代谢;而芎芍/模型组相关通路则集中在凋亡、丁酸代谢、过氧化物酶体、磷酸戊糖、嘌呤代谢、胰岛素抵抗。进一步分析,筛选出两比较组24个共有的差异蛋白,其中聚ADP核糖聚合酶2(Poly[ADP-ribose]polymerase2,PARP2)可能为芎芍胶囊调节脂质代谢的新靶点,模型组PARP2表达增加,而以芎芍胶囊有效组分干预泡沫化的联合药物组PARP2表达降低。结论:(1)芎芍胶囊药理作用可能涉及AS相关的基因靶点13个,包括胆固醇跨膜转运、凝血反应、胆固醇酯代谢、炎症反应、脂质氧化修饰、细胞粘附等多个环节,预测结果与芎芍胶囊前期研究相一致,同时也提供了新的潜在靶标基因,为芎芍胶囊后续抗动脉粥样硬化研究提供了新的思路。(2)大鼠源性血清本身含有大量脂质,可造成RAW264.7细胞出现胆固醇蓄积,甚至泡沫化,掩盖了芎芍胶囊可能促进泡沫细胞胆固醇流出的作用,不适用于探索RAW264.7源性泡沫细胞胆固醇流出的药物研究。(3)芎芍胶囊可以激活PPARy/LXRα通路,上调ABCAI、ABCG1、SR-B1表达,促进泡沫细胞胆固醇外流,并抑制TNF-α、IL-1β、MCP-1的释放,防治RAW264.7巨噬细胞泡沫化。芎芍胶囊的抗动脉粥样硬化能力不仅与胆固醇逆转运有关,可能还与抗炎能力有关。(4)通过蛋白质组学技术分析发现芎芍胶囊参与脂质调节的新靶点——PARP2,芎芍胶囊有效组分可能通过抑制PARP2表达,上调ABCA1表达,促进细胞内脂质外流。(本文来源于《北京中医药大学》期刊2019-05-01）
代佩[6]（2019）在《同型半胱氨酸诱导miR-33经PPARα-LXRα途径抑制胆固醇逆转运的机制研究》一文中研究指出目的:研究同型半胱氨酸(HCY)诱导miR-33是否通过氧化物酶增殖物激活受体α(PPARα)-肝脏X核受体α(LXRα)途径抑制胆固醇逆转运(RCT),促进脂质聚集,导致动脉粥样硬化(AS)。方法:实验一:(1)RAW264.7巨噬细胞经氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导成为泡沫细胞,油红“O”染色鉴定泡沫细胞是否诱导成功。(2)再给予不同浓度梯度(空白对照组、0.5 mmol/L、1.0 mmol/L、2.0 mmol/L、5.0 mmol/L)同型半胱氨酸(HCY)干预。(3)油红“O”染色观察细胞内脂滴情况。(4)蛋白免疫印迹(Western blot)和实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测叁磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)、叁磷酸腺苷结合盒转运体G1(ABCG1)及过氧化物酶增殖物激活受体α(PPARα)、肝脏X核受体α(LXRα)的蛋白和mRNA表达水平。(5)高效液态相谱检测胞内胆固醇酯含量。(6)液体闪烁计数法分析胞内胆固醇流出率。实验二:(1)RAW264.7巨噬细胞经氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导成为泡沫细胞模型,油红“O”染色确定模型是否诱导成功。(2)用lipofectamin 2000?将miR-33 mimics、miR-33 inhibitor转染入细胞内,再选取实验一抑制胆固醇逆转运最佳HCY浓度(5.0 mmol/L)干预24 h进行实验。(3)油红“O”染色观察细胞内脂滴情况。(4)蛋白免疫印迹(Western blot)和实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测叁磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)、叁磷酸腺苷结合盒转运体G1(ABCG1)及过氧化物酶增殖物激活受体α(PPARα)、肝脏X核受体α(LXRα)蛋白和mRNA表达水平。(5)实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测miR-33 mRNA表达含量。(6)高效液态相谱检测胞内胆固醇酯含量。(7)液体闪烁计数法分析胞内胆固醇流出率。结果:结果一:(1)与空白对照组相比较,HCY干预组ABCA1、ABCG1及PPARα、LXRα的蛋白和mRNA的表达量均降低,差异具有统计学意义(P<0.05);细胞内的胆固醇含量均增高,差异具有统计学意义(P<0.05);细胞内胆固醇流出率降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。(2)随HCY浓度增加,组间相比较,结果是浓度越高,ABCA1、ABCG1及PPARα、LXRα的蛋白和mRNA表达量越低,差异具有统计学意义(P<0.05);细胞内的胆固醇含量越高,差异具有统计学意义(P<0.05);细胞内胆固醇流出率越低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结果二:(1)随HCY浓度增加,组间相比较,结果是浓度越高,miR-33 mRNA表达含量越高,差异具有统计学意义(P<0.05)。(2)与对照组相比,miR-33 mimics组ABCA1、ABCG1及PPARα、LXRα蛋白和mRNA的表达量均降低,差异具有统计学意义(P<0.05);细胞内胆固醇含量逐渐增加,差异具有统计学意义(P<0.05);细胞内胆固醇流出率逐渐减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。(3)与对照组相比,miR-33 inhibitor组ABCA1、ABCG1及PPARα、LXRα蛋白和mRNA的表达量均升高,差异具有统计学意义(P<0.05);细胞内胆固醇含量逐渐降低,差异具有统计学意义(P<0.05);细胞内胆固醇流出率逐渐增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。(4)空白对照组、miR-33 mimics NC组和miR-33 inhibitor NC组3组间相比较,所有检测指标均无统计学差异(P>0.05)。结论:1.同型半胱氨酸(HCY)通过抑制ABCA1和ABCG1蛋白及mRNA表达,降低胆固醇逆转运(RCT)效率,促进脂质聚集,导致动脉粥样硬化(AS)。2.同型半胱氨酸(HCY)通过抑制PPARα-LXRα通路下调ABCA1和ABCG1蛋白及mRNA表达,降低胆固醇逆转运(RCT)效率,促进脂质聚集。3.同型半胱氨酸(HCY)可以诱导miR-33含量增加,提示两者具有相关性。4.同型半胱氨酸(HCY)通过诱导miR-33抑制ABCA1和ABCG1蛋白及mRNA表达,降低胆固醇逆转运(RCT)效率,促进脂质聚集,导致动脉粥样硬化(AS)。5.同型半胱氨酸(HCY)通过诱导miR-33抑制PPARα-LXRα途径下调ABCA1和ABCG1蛋白及mRNA表达,降低胆固醇逆转运(RCT)效率,促进脂质聚集,导致动脉粥样硬化(AS)。(本文来源于《山西医科大学》期刊2019-04-20）
梅俊,徐凤芹[7]（2019）在《高密度脂蛋白逆转运胆固醇的分子生物学基础》一文中研究指出高密度脂蛋白(HDL)能够将胆固醇从泡沫细胞中转运到肝脏,代谢转化为胆汁排出体外,进而产生抗动脉粥样硬化作用,称之为HDL的胆固醇逆转运(RCT)。因此,如何提高HDL浓度并促进HDL的功能,充分发挥其抗动脉粥样硬化的功能,成为近年来研究的热点。但研究显示单纯升高HDLC并未发现有明显的临床效果,揭示了HDL功能的复杂性。因此有必要进行系统的回顾HDL的分子结构、合成、代谢等,重新认识其RCT功能的分子生物学基础,为进一步研究HDL的RCT功能提供理论支撑。(本文来源于《中国动脉硬化杂志》期刊2019年03期）
刘雅婧,马倩倩,员旭红,李佳,申晓彧[8]（2019）在《罗格列酮联合依折麦布对脂化后血管平滑肌细胞胆固醇逆转运的影响及可能机制的研究》一文中研究指出目的探究罗格列酮联合依折麦布对脂化血管平滑肌细胞(SMC)胆固醇含量的影响及可能机制。方法将原代大鼠胸主动脉SMC分空白对照组、泡沫细胞组、依折麦布3.0、10.0、30.0μmol/L组、罗格列酮组(25.0μmol/L)、联合组(罗格列酮25.0μmol/L+依折麦布30.0μmol/L)。采用酶荧光法检测各组细胞内总胆固醇(TC)及游离胆固醇(FC)的含量,并计算胆固醇酯(CE)值。RT-PCR检测肝X受体α(LXRα)和叁磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)mRNA表达,Western blot检测LXRα和ABCA1蛋白表达量。结果泡沫细胞组较空白对照组LXRα和ABCA1mRNA(0.2980±0.0247 vs 1.0010±0.0554,0.3022±0.0266 vs 1.0009±0.0526)以及蛋白表达均减少(P<0.05),TC、FC和CE含量显着增加(P<0.05);与泡沫细胞组比较,依折麦布组3.0、10.0、30.0μmol/L、罗格列酮组和联合组LXRα和ABCA1mRNA及蛋白表达均增加,依折麦布组则呈现浓度依赖性;依折麦布组30.0μmol/L、罗格列酮组和联合组TC、FC和CE含量减少(P<0.05);且联合组LXRα和ABCA1mRNA及蛋白增加更为明显(P<0.05)。结论罗格列酮与依折麦布联合,显着减少细胞内胆固醇含量,增加SMC内的胆固醇逆转运效率,其机制可能与LXRα-ABCA1通路有关。(本文来源于《中华老年心脑血管病杂志》期刊2019年03期）
代佩,高奋[9]（2018）在《同型半胱氨酸与胆固醇逆转运的研究进展》一文中研究指出胆固醇逆转运(RCT)是机体将外周组织多余的胆固醇经高密度脂蛋白胆固醇(HDL)携带、转运至肝脏合成甾体激素或代谢成胆汁酸排出体外的过程~([1])。动脉粥样硬化(AS)是冠心病发生的病理机制,在AS的早、晚期阶段,细胞外内皮聚集大量的未脂化的胆固醇主要以HDL为载体通过RCT排出体外~([2])。同型半胱氨酸(Hcy)可以通过:(1)炎症反应与氧化应激;(2)损伤血管内皮细胞;(3)影响凝血功能,导致血栓形成;(4)促(本文来源于《中国药物与临床》期刊2018年11期）
汪雄,张玲,陶凌[10]（2018）在《GDF11通过上调ABCA1表达促进小鼠体内胆固醇逆转运》一文中研究指出目的研究生长分化因子11(GDF11)对巨噬细胞胆固醇逆转运的影响,并探究GDF11发挥作用的具体机制。方法提取小鼠腹腔巨噬细胞后给予氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)、GDF11和激活素受体样激酶7(ALK7)抑制剂SB431542孵育24 h。利用油红O染色观察细胞脂质蓄积,提取总m RNA和总蛋白后,利用realtime PCR和Western blot检测GDF11、叁磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)和叁磷酸腺苷结合盒转运体G1(ABCG1)的m RNA和蛋白表达水平。给予小鼠腹腔注射外源GDF11,提取腹腔巨噬细胞用3H标记的胆固醇孵育后注射回小鼠腹腔内,每8 h收集一次小鼠粪便,48 h后收集小鼠肝脏和血液样本,检测样本3H含量,计算胆固醇逆转运水平。结果 ox-LDL孵育24 h显着诱导巨噬细胞内脂质蓄积,同时抑制GDF11 m RNA及蛋白的表达。GDF11处理能有效抑制ox-LDL诱导的巨噬细胞脂质蓄积,同时显着诱导ABCA1 m RNA及蛋白的表达。经外源补充GDF11后显着提高小鼠体内胆固醇逆转运水平。GDF11孵育巨噬细胞后,在给予巨噬细胞ALK7抑制剂SB431542孵育后,GDF11对ox-LDL诱导细胞内脂质蓄积的抑制作用被拮抗,对ABCA1表达的调控作用也被抑制。结论 GDF11通过ALK7调节ABCA1的表达,从而促进巨噬细胞胆固醇逆转运。(本文来源于《中国动脉硬化杂志》期刊2018年04期）
逆转运论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:观察苏木提取物对体内外胆固醇逆转运及相关分子信号通路的影响,探讨苏木提取物抗动脉粥样硬化的作用机制。方法:实验一:人THP-1单核细胞PMA诱导分化为巨噬细胞,应用50μg/ml ox-LDL和0.2μCi/ml ~3H胆固醇孵育细胞,应用不同浓度和不同作用时间的苏木提取物含药血清处理细胞。油红O染色鉴定泡沫细胞的形态;HPLC检测细胞内胆固醇水平;闪烁计数法检测细胞内胆固醇流出率。实验二:40只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、苏木组、辛伐他汀组,每组10只。空白组给予普通饲料喂养,其余3组给予高脂饲料及腹腔注射维生素D_3复制动脉粥样硬化模型,模型复制时间12周。第13周空白组及模型组大鼠给予等体积羧甲基纤维素钠溶液灌胃;苏木组给予苏木提取物混悬剂灌胃;辛伐他汀组给予辛伐他汀混悬剂灌胃,连续给药4周。第16周末,大鼠麻醉称重取材,HE染色观察大鼠主动脉及肝脏形态学变化;全自动生化仪测定血清TG、TC、LDL-C、HDL-C水平;ELISA法检测血清IFN-γ、TNF-α、IL-6水平;免疫组化法观察大鼠腹主动脉CD40L蛋白表达;Western Blot、RT-PCR法检测大鼠肝脏PPARγ、LXRα、ABCA1、Cav-1、SR-BI蛋白及基因表达。结果:(1)苏木提取物含药血清呈浓度、时间依赖性促进THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇流出,降低细胞内TC、FC、CE含量。(2)HE染色显示苏木提取物能够减少血管壁脂质沉积,同时减轻肝脏细胞炎症肿胀及细胞内脂滴。(3)血清TC、TG、LDL-C、HDL-C结果:与空白组比较,模型组大鼠血清TC、TG、LDL-C水平升高(P<0.01);与模型组比较,苏木组、辛伐他汀组大鼠血清TC、TG水平降低(P<0.05,P<0.01)。(4)血清IF N-γ、TNF-α、IL-6结果:与空白组比较,模型组大鼠血清IFN-γ、TNF-α、IL-6水平增加(P<0.01),与模型组比较,苏木组、辛伐他汀组大鼠血清IFN-γ、TNF-α、IL-6水平降低(P<0.01)。(5)CD40L免疫组化结果:与空白组比较,模型组大鼠腹主动脉CD40L蛋白表达强度增加(P<0.01);与模型组比较,苏木组、辛伐他汀组大鼠腹主动脉CD40L蛋白表达下调(P<0.01)。(6)Western Blot及PCR结果:与空白组比较,模型组大鼠肝脏组织中PPARγ、LXRα、ABCA1、Cav-1、SR-BI蛋白及基因表达下调(P<0.01),与模型组比较,苏木组、辛伐他汀组大鼠肝脏组织中PPARγ、L XRα、ABCA1、Cav-1、SR-BI蛋白及基因表达上调(P<0.05,P<0.01)。结论:1.苏木提取物含药血清呈浓度和时间依赖性促进细胞内胆固醇流出;2.苏木提取物能够减轻动脉粥样硬化模型大鼠腹主动脉及肝脏病理损伤;3.苏木提取物能够降低动脉粥样硬化模型大鼠血清TC、TG、IFN-γ、TNF-α、IL-6水平,下调CD40L蛋白表达,抑制炎症反应;4.苏木提取物促进胆固醇逆转运发挥抗动脉粥样硬化的作用,部分机制可能与上调肝脏组织中PPARγ、LXRα、ABCA1、Cav-1、SR-BI蛋白及基因的表达相关。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
逆转运论文参考文献
[1].戎光,周庆兵,李婧,梅俊,金宇.化浊通脉方对ox-LDL诱导的RAW264.7来源泡沫细胞胆固醇逆转运相关基因表达作用研究[J].陕西中医.2019
[2].于海睿.苏木提取物对动脉粥样硬化模型大鼠胆固醇逆转运的影响[D].黑龙江中医药大学.2019
[3].周庆兵,戎光,李靖,梅俊,金宇.化浊通脉方对ox-LDL诱导的RAW264.7来源泡沫细胞胆固醇逆转运相关基因的表达作用研究[C].中国中西医结合学会第八届虚证与老年医学专业委员会、中国老年学和老年医学学会中西医结合分会、江苏省中医药学会老年医学专业委员会2019年学术年会论文集.2019
[4].刘季晨.LCK-ZAP70对胆固醇逆转运及动脉粥样硬化的影响和机制研究[D].南方医科大学.2019
[5].梅俊.从胆固醇逆转运途径探讨芎芍胶囊抗动脉粥样硬化机制研究[D].北京中医药大学.2019
[6].代佩.同型半胱氨酸诱导miR-33经PPARα-LXRα途径抑制胆固醇逆转运的机制研究[D].山西医科大学.2019
[7].梅俊,徐凤芹.高密度脂蛋白逆转运胆固醇的分子生物学基础[J].中国动脉硬化杂志.2019
[8].刘雅婧,马倩倩,员旭红,李佳,申晓彧.罗格列酮联合依折麦布对脂化后血管平滑肌细胞胆固醇逆转运的影响及可能机制的研究[J].中华老年心脑血管病杂志.2019
[9].代佩,高奋.同型半胱氨酸与胆固醇逆转运的研究进展[J].中国药物与临床.2018
[10].汪雄,张玲,陶凌.GDF11通过上调ABCA1表达促进小鼠体内胆固醇逆转运[J].中国动脉硬化杂志.2018
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