吴赞开彭俊云陈群芳莫善钰
(广东省高要市人民医院526040)
【摘要】目的分析HPV高危型别检测联合液基薄层细胞学检测(TCT)对宫颈病变的筛查效果。方法选取1568例宫颈病变筛查患者作为观察对象，对所有入选对象均进行HPV高危型别检测，检测结果阳性患者进行TCT检测。TCT检查诊断为非典型鳞状上皮意义不明确(ASCUS)及以上的妇女和高危型HPV阳性患者均在阴道镜下取病理活。对所有检测结果进行统计分析。结果①HPV检测结果1568例患者HPVDNA阳性率为19.58%(307/1568)。②TCT检测结果307例标本中结果为WNL的样本高危型HPV的感染率为10.10%(31/307)，结果为ASCUS以上的样本高危型HPV的感染率为89.90%(276/307)。③TCT检测结果为WNL和ASCUS的标本HPV各型别病毒载量差别不明显(P>0.05)。④TCT检测和阴道镜检测阳性符合率分别为：WNL90.32%(28/31)；ASCUS及以上90.55%(278/307)。结论HPV型别检测联合TCT检测可有效的提高对宫颈病变阳性检出率的效果。
【关键词】HPV高危型别检测液基薄层细胞学检测宫颈病变
【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2014）20-0237-02
宫颈癌是女性常见的恶性肿瘤，发病在近年来呈现年轻化的趋势[1]。因此，对宫颈疾病的筛查也成为临床的重点工作之一。近年研究资料显示[2]，人乳头瘤病毒(HPV)感染是导致宫颈癌发生的重要原因。HPV作为一种在自然界广泛传播的、分型较多的病毒，临床根据其致癌特点常将其分为高危型HPV和低危型HPV两种[3]。本研究纳入1568例宫颈病变筛查患者作为观察对象，对其进行HPV高危型别检测和液基薄层细胞学检测(TCT)，旨在了解两种方式联合应用在宫颈疾病筛查中的作用。
1资料与方法
1.1一般资料选取2013年1月至2014年3月进行宫颈筛查的1568例患者的作为观察对象，所有入选对象均无子宫和宫颈手术史。患者年龄23-69岁，平均(35.83±8.62)岁；所有患者均有外阴瘙痒、白带增多或接触性出血病史。
1.2方法
1.2.1HPV高危型别检测
1.2.1.1检测方法采用荧光定量检测。将棉签在宫颈口逆时针旋转三圈，并作短暂停留，后将棉签置于密闭的试管中送检，从用DNA提取液提取样本基因组DNA作为模版备用。每个标本同时急性三个平行反应管检测。①用两种不同的荧光检测HPV16，18和45，同时加入HPV16,18基因质粒DNA。后按倍数对其进行稀释，并与标本同步扩增，建立标准曲线。②用两种不同的荧光检测HPV31，33，52，58和67，同时加入HPV58，31基因质粒DNA。同样对其进行倍数稀释，并扩增，建立标准曲线。③采用含有β球蛋白基因的质粒DNA进行绝对定量检测，以了解提取的DNA是否适宜进行扩增反应。若β球蛋白基因扩增反应呈阴性则应重新取样后再检测。
1.2.1.2结果的判读FAM通道的反应1阳性为HPV16，反应2为阳性则为HPV33，52，58，67；VIC通道的反应1阳性为HPV18，45，反应2阳性则为HPV31。
1.2.2TCT检查采用美国新柏氏液基细胞学制片技术，按TBS细胞学分级进行诊断。
1.2.3组织病理学检测电子阴道镜下组织活检，HE染色后镜检。
1.2.4病毒载量的计算通过加入的已知浓度标准参照品相对照，仪器软件自动计算。
1.3统计学处理本研究里所有数据均由SPSS13.0数据分析软件处理而得，计量资料用x-±s表示，差异性比较采用t检验，计数资料比较用χ2检验，以P<0.05为表示结果具有统计学意义。
2结果
2.1HPV检测结果入选的1568例患者中HPVDNA阳性共307例，阳性率为19.58%(307/1568)。
2.2TCT检测结果307例HPVDNA阳性标本中经TCT检测结果为WNL的样本高危型HPV的感染共31例，感染率为10.10%(31/307)；经TCT检测结果为ASCUS以上的样本高危型HPV的感染共276例，感染率为89.90%(276/307)。
2.3病毒载量TCT检测结果为WNL和ASCUS的标本HPV各型别病毒载量差别不明显，见表1。
表1TCT检测不同结果标本HPV各型别病毒载量比较(x-±s,×105)
2.4TCT检测结果与病理组织结果TCT与阴道镜的阳性符合率分别为：WNL90.32%(28/31)；ASCUS及以上90.55%(278/307)。
3讨论
高危型HPV检测和TCT检测都是宫颈癌筛查中较为常用的方法[4]。高危型HPV检测通过提取宫颈处的分泌物和脱落细胞，可对多种高危型HPV-DNA进行检测，特异性较高，是判断宫颈癌癌前病变的有效方式。TCT检测是一种较为成熟的宫颈癌筛查技术，对宫颈癌及宫颈高度病变均有较高的灵敏度和特异度[5]。本研究将两种方式联合应用到宫颈病变的筛查中，先对高危型别进行分型、定量检测，将检测结果为阳性的患者再行TCT检测盒阴道镜检查。经统计分析发现，TCT检测结果为WNL的患者，高危型HPV感染率为10.1%，而结果为ASCUS及以上的患者高危型HPV的感染率为89.9%。较好的说明了随着宫颈疾病的进展，高危型HPV感染也更为严重。但高危型HPV各型别的病毒载量在TCT检测结果为WNL和ASCUS及以上的患者中差别不明显(表1中，各型别比较，P>0.05)。同时TCT检测和电子阴道镜检测的符合率均在90%以上。因此，在宫颈病变的筛查工作中将HPV高危型别检测和TCT检测联合进行应用可有效的提高阳性检出率，有助于提高宫颈癌及癌前病变的准确性，在宫颈癌的防治和治疗工作中都具有重要意义。
参考文献
[1]孙美凤,常裕文,谭涵.宫颈液基细胞学与HPV检测在宫颈癌筛查中的作用探讨[J].新疆医学,2011,41(11):23-28.
[2]马勤宜.TCT及HPV检测在绝经后妇女宫颈癌筛查中的应用[J].中国妇幼健康研究,2013,24(4):550-552.
[3]SalihMM,SafiME,HartK,etal.GenotypesofhumapapillomavirusinSudanesewomenwithcervicalpathology[J].InfectAgentCancer,2010,5:26.
[4]陈丽霞.薄层液基细胞学检查联合人乳头瘤病毒检测在宫颈癌筛查中的应用价值[J].中国医师进修杂志,2009,32(15):51-53.
[5]孙笑非,顾依群,王爱春,等.高危型人乳头瘤病毒检测结合薄层细胞学检查在宫颈癌筛查中的价值评估[J].中华实验和临床病毒学杂志,2013,27(4):273-276.