巢湖蓝藻藻蓝蛋白纯化工艺的优化

论文摘要

目的优化巢湖蓝藻藻蓝蛋白的纯化工艺。方法将新鲜蓝藻藻泥经冻融破壁处理,获得藻蓝蛋白粗提液。采取两步盐析及Cellfine A-500阴离子交换层析结合法进行纯化,并以纯度和回收率为检测指标,对一步盐析摩尔浓度（0.8、1.0、1.2、1.4、1.6 mol/L）及二步盐析摩尔浓度（1.6、1.8、2.0、2.2、2.4 mol/L）、阴离子交换层析缓冲液pH（6.0、6.5、7.0、7.5、8.0）、进样浓度（0.418、0.726、1.044、1.288、2.090 mg/L）、洗脱速度（0.5、1、1.5、2、2.5、3.0 cm/min）及洗脱液盐梯度浓度[（0.08、0.10、1.0）、（0.08、0.15、1.0）、（0.08、0.20、1.0）、（0.08、0.25、1.0）、（0.08、0.30、1.0）mol/L]进行优化。同时采用最适条件纯化3批藻蓝蛋白。结果两步盐析的最适摩尔浓度分别为1.0和1.8 mol/L,阴离子交换层析最适条件为缓冲液p H 7.0,进样浓度为1.0～2.0 mol/L,洗脱流速为2 cm/min,洗脱液盐梯度浓度为0.08、0.20、1.0 mol/L。最适条件纯化的3批藻蓝蛋白纯度可达4.0以上,回收率达11%以上。结论成功优化了巢湖蓝藻藻蓝蛋白的纯化工艺,纯化出了试剂级（纯度4.0以上）的藻蓝蛋白。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 供试品
•   1.2 主要试剂
•   1.3 藻蓝蛋白粗提液的制备
•   1.4 两步盐析提取藻蓝蛋白条件的优化
•   1.5阴离子交换层析条件的优化
•     1.5.1 p H的优化
•     1.5.2 进样浓度的优化
•     1.5.3 洗脱流速的优化
•     1.5.4洗脱液盐浓度的优化
•   1.6 藻蓝蛋白回收率的计算和纯度的测定
•   1.7 最适条件纯化结果的验证
• 2 结果
•   2.1 两步盐析提取藻蓝蛋白条件的优化
•     2.1.1 一步盐析条件的优化
•     2.1.2 二步盐析条件的优化
•   2.2 阴离子交换层析条件的优化
•     2.2.1 p H的优化
•     2.2.2 进样浓度的优化
•     2.2.3 洗脱速度的优化
•     2.2.4 洗脱液盐浓度的优化
•   2.3 最适条件纯化结果的验证
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 何涛,苏雨,张发宇,余金卫,武康,汪家权

关键词: 巢湖,蓝藻,藻蓝蛋白,盐析,阴离子交换层析

来源: 中国生物制品学杂志 2019年03期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,工程科技Ⅰ辑

专业: 一般化学工业

单位: 合肥工业大学资源与环境工程学院

基金: 国家“十二五”科技重大专项资助项目(2012ZX07103-004)

分类号: TQ936

DOI: 10.13200/j.cnki.cjb.002519

页码: 319-323

总页数: 5

文件大小: 227K

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