一种自制DNA提取剂在微量细胞和单个囊胚上的应用

论文摘要

目前微量DNA的提取方法,不仅操作繁琐耗时,而且所需试剂价格昂贵。为了解决这个问题,本研究旨在开发一种快速、经济的微量DNA提取剂。用自制提取剂快速提取50个、100个、500个、5 000个、50 000个猪胎儿成纤维细胞的基因组DNA。经PCR扩增,电泳结果显示:自制提取剂可有效提取数量低至50个的猪胎儿成纤维细胞。分别采用自制提取剂、酚氯仿以及试剂盒3种方法提取猪单个囊胚基因组DNA,结果显示:酚氯仿方法提取的单个囊胚基因组DNA,经PCR扩增后,并没有检测到目的条带;而自制提取剂提取模板DNA,能直接扩增出清晰的目的条带,与试剂盒扩增效果相当。自制提取剂能够快速、有效地提取少量细胞和单个囊胚的基因组DNA,满足下游分子生物学研究需要,因此,本研究为微量样本基因组DNA提取提供帮助。

论文目录

• 1 结果与分析
•   1.1 自制DNA提取剂在猪胎儿成纤维细胞上的应用
•   1.2 猪囊胚细胞数统计
•   1.3 3种基因组DNA提取方法在猪单个囊胚上的应用
• 2 讨论
• 3 材料与方法
•   3.1 主要材料
•   3.2 猪胎儿成纤维细胞复苏及细胞计数
•   3.3 微量细胞基因组DNA提取
•   3.4 微量基因组DNA PCR扩增及检测
•   3.5 猪囊胚体外培养及细胞计数
•   3.6 单个囊胚基因组DNA提取
• 作者贡献

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 游小燕,范骁琳,何琦琳,刘雪芹

关键词: 基因组,猪胎儿成纤维细胞,单个囊胚

来源: 基因组学与应用生物学 2019年09期

年度: 2019

分类: 基础科学,医药卫生科技

专业: 生物学

单位: 重庆市畜牧科学院,农业部养猪科学重点实验室,养猪科学重庆市市级重点实验室

基金: 重庆市基本科研业务费项目(16419)资助

分类号: Q78

DOI: 10.13417/j.gab.038.004008

页码: 4008-4012

总页数: 5

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