基于RNA-Seq技术的MDCK细胞成瘤性关键基因的验证

论文摘要

MDCK细胞（Madin-Daby Canine Kidney Cells）由于其病毒感染效率高、增殖快,且不易变异等特点,适用于流感疫苗的生产,但是其对免疫缺陷小鼠具有很高的成瘤性,一直以来,探究无成瘤的MDCK细胞株成为科研人员的研究重点。本研究通过试验筛选出与成瘤相关的12个基因,运用实时荧光定量反转录聚合酶链反应（qRT-PCR）,获得这些基因在高成瘤MDCK-W73,低成瘤MDCK-C35和MDCK-C09细胞株中的相对表达量。结果表明,提取的RNA纯度高,完整性好。各基因在不同成瘤性细胞中的表达具有差异性,且qRT-PCR与RNA-Seq的差异性表达相一致。由此说明,RNA-Seq测序结果真实可靠,为后续的试验奠定了良好的基础。

论文目录

• 1 材料和方法
•   1.1 总RNA抽提
•   1.2 反转录获得cDNA
•   1.3 实时荧光定量反转录聚合酶链反应（qRT-PCR）检测成瘤相关基因表达
•   1.4 数据分析
• 2 结果
•   2.1 总RNA提取与质检结果
•   2.2 qRT-PCR检测基因表达
•   2.3 qRT-PCR与高通量测序（RNA-Seq）的数据对比
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 贺丹,杨迪,王家敏,柏家林

关键词: 细胞,成瘤基因

来源: 甘肃畜牧兽医 2019年12期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学

单位: 西北民族大学生物医学研究中心甘肃省动物细胞技术创新中心,西北民族大学生命科学与工程学院,西北民族大学实验教学部

基金: 国家科技重大专项重大新药创制项目(2015ZX09102016),西北民族大学动物细胞培养与代谢工程创新团队(31920190004)

分类号: Q813

DOI: 10.15979/j.cnki.cn62-1064/s.2019.12.013

页码: 37-42

总页数: 6

文件大小: 1644K

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