高密度发酵重组大肠杆菌产海藻糖合成酶

论文摘要

酶法催化是目前生产海藻糖的主要手段。本文中,笔者通过高密度发酵重组大肠杆菌产海藻糖合成酶,进而以麦芽糖为底物,催化生产海藻糖。首先根据大肠杆菌高密度发酵条件要求,在揺瓶中对基因工程菌进行了培养基、发酵条件和诱导条件的逐一优化;然后在5 L和50 L发酵罐中进行批次补料发酵的放大实验;最后采用变指数-恒pH法的策略发酵重组大肠杆菌,结果OD600达到97,海藻糖合成酶酶活达到（24 000±350） U/mL,实现了海藻糖合成酶的重组大肠杆菌高密度发酵生产,极大提高了海藻糖的生产效率。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 实验菌种
•   1.2 主要试剂
•   1.3 主要仪器
•   1.4 主要溶液与培养基
•   1.5 试验方法
•     1.5.1 重组大肠杆菌发酵生产海藻糖合成酶
•     1.5.2 海藻糖合成酶的酶活力测定方法
•     1.5.3 高效液相色谱法测定产物与底物
• 2 结果与讨论
•   2.1 最佳接种时间的确定
•   2.2 发酵培养基的优化
•     2.2.1 葡萄糖浓度的优化
•     2.2.2 氮源的选择
•     2.2.3 微量元素的选择
•   2.3 培养条件及诱导条件的优化
•     2.3.1 pH的优化
•     2.3.2 诱导温度的优化
•     2.3.3 诱导剂添加时间的优化
•   2.4 分批发酵
•   2.5 分批补料技术
•     2.5.1 指数流加法
•     2.5.2 变指数流加-恒pH法
• 3 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 晏星辰,黄璞,王鑫沂,姜艳芝,李斯斯,辛松,江凌,黄和

关键词: 海藻糖,海藻糖合成酶,大肠杆菌,高密度发酵,变指数恒法

来源: 生物加工过程 2019年04期

年度: 2019

分类: 基础科学,工程科技Ⅰ辑

专业: 一般化学工业

单位: 南京工业大学生物与制药工程学院,南京工业大学食品与轻工学院,南京工业大学药学院

基金: 国家自然科学基金联合基金(U1603112),江苏省环保厅项目(2016053),江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目(2015-JY-009),江苏省自然基金面上基金(BK20171461),江苏省先进生物制造创新中心项目(XTE1838)

分类号: TQ925

页码: 385-391

总页数: 7

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