导读:本文包含了核膜核苷叁磷酸酶论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:磷酸酶,狭窄,活性,血管,大鼠,进展,论文。
核膜核苷叁磷酸酶论文文献综述
聂磊,韩梅,温进坤[1]（2003）在《核膜核苷叁磷酸酶研究进展》一文中研究指出核膜核苷叁磷酸酶 (nucleoside triphosphatase,NTPase,EC3.6 .1.15 )定位于核孔复合体的周围 ,是调节 m RNA出核转运的关键酶之一 ,通过水解 NTP为 m RNA的出核转运提供能量〔1〕。真核细胞由于细胞核(本文来源于《中国老年学杂志》期刊2003年08期）
聂磊[2]（2002）在《核膜核苷叁磷酸酶活性测定及其在血管再狭窄过程中的意义》一文中研究指出目的：建立一种检测核膜核苷叁磷酸酶(nucleoside triphosphatase，NTPase，EC 3.6.1.15)的方法，并利用大鼠主动脉内皮剥脱术后再狭窄模型，探讨内皮剥脱术后不同时间血管壁核膜NTPase活性变化及其与血管平滑肌细胞(vascular smooth musclecell，VSMC)物质代谢及细胞增殖的关系。 方法： 1．核膜NTPase测定方法的建立：(1)大鼠主动脉细胞核的提取：大鼠处死后立即取血管，刮除血管内皮后，用STM缓冲液匀浆，过滤，离心，沉淀的细胞核重悬于DS缓冲液，离心，加入裂解缓冲液，离心，取上清液测定NTPase活性。(2)核膜NTPase活性的测定：用722型分光光度计在820nm处比色测定反应产生的无机磷(Pi)。以不同浓度的KH_2PO_4做标准磷液，酶活性用nmolPi·mg~(-1)Pr·min~(-1)表示。由于刮除内皮的血管中，主要的细胞成分是VSMC，因此，本实验方法测得的NTPase活性可以反映正常及主动脉内皮剥脱后血管壁VSMC中的NTPase活性变化。 2．主动脉内皮剥脱模型的建立及分组：将SD大鼠随机分为5组，每组6只，对照组，3天组，7天组，14天组，21天组。分别于手术后3d、7d、14d、21d取大鼠 中文摘要胸腹主动脉损伤部位血管段进行形态学观察和 NTPase活性及相关指标的测定。 3．主动脉平滑肌 a－肌动蛋白oM a《ctin）和骨桥蛋白bsteopontin，OPN）Western印迹分祈：取对照组、主动脉内皮剥脱术后3天、7天、14天、ZI天的大鼠主动脉蛋白提取液进行SDS－PAGE。电印迹转至硝酸纤维素膜上，随后与一抗、h抗进行结合反应，Western印迹结果用美国 Kodak公司 ID数码成像分析系统软件进行定量分析。 4．主动脉 5’－核昔酸酶（5’－nucleotidase，5’－NT EC3．l．3．5）、腺昔脱氨酶（adenosine de删Inase，ADA，EC3．5．4．4）和琉琅酸脱氢酶（succinate dehydrogenase，SDH，EC．3．99＊）活性的测定：大鼠主动脉匀浆后的上清用于测定 5’－NT和 SDH的活性，主动脉细胞核提取液用于测定ADA的活性。 结果： 1．核膜NTPase测定方法的建立：根据NTPase水解核昔叁磷酸生成的无机磷可与钥酸作用生成磷钥酸，后者可被还原剂还原成钥蓝的原理，用比色法测定NTPase活性。结果表明：本实验所建立的方法重复性好（批内差异3．8％叶．72％之间，批间差异系数为4．7％，均小于5％；酶活性为 10 u mol／L－250 u mol／L时线性关系最好，最低检出限为 5 u mol／L人 说明该方法具有稳定、灵敏、可靠、简便易行等优点，适于一般实验室应用。 2．主动脉内皮剥脱模型的建立：大鼠主动脉切片经HE染色显示，正常对照组大鼠主动脉壁各层结构完整， 2 中文摘要 内膜光滑，中膜VSMC排列整齐。主动脉内皮剥脱后3 大时，与正常血管壁相比，内膜显得粗糙，局部可见增生： 内皮剥脱后7天时，内膜出现显着的不规则增生，新生内 膜中可见局灶性细胞增殖，中膜VSMC核排列紊乱，在 新生内膜弹性膜附近处，VSMC走行改变，凸向管腔；术 后14上 大，内膜呈进行性弥漫性增厚，管腔变小，增厚 的内膜以细胞成分为主。上述形态学变化提示本研究所建 立的内皮剥脱后血管再狭窄动物模型是成功的。 3．主动脉内皮剥脱术后血管壁核膜NTPase活性的动 态变化：大鼠主动脉内皮剥脱后3大，NTPase活性较对 照组略有升高，但不明显（P＞0刀5人 至7天时，NTPase 活性显着升高（尸＜0刀5人 约为对照组的2倍。主动脉内 皮剥脱后14无至ZI大，该酶的活性持续升高，至ZI大 时，其活性是对照组的3倍左右。NTPase活性变化与血 管新生内膜厚度呈正相关（r＝o．918，P＜0刀5人 4．主动脉内皮剥脱术后VSMC表型标志蛋白的表达 变化：Western印迹分析表明，正常血管中分化型VSMC 标志蛋白 SM a仑ctin高表达，剥脱后 3天，SM。刁ctin 表达开始下降；7大时，SM Q《ctin的水平较对照降低了 24％；至 ZI 天时，SM Q－actin下降了 3 8％。SM Q－actin 的变化趋势与血管壁病变程度成反相关。OPN是去分化 型VSMC的标志蛋白，在正常大鼠主动脉OPN含量极微， 内皮剥脱后3天，动脉壁OPN水 迅速升高，达对照组 的13．3倍；至14大时，＊PN表达釉。达到高峰，是对照 组的3O二倍：内皮剥脱后刀天时，0＊N略有降低，但仍 维持在较高水平。OPN表达的时程变化与血管内膜增厚 3 中文摘要具有明显的正相关性。上述结果提示，内皮损伤诱发了中膜VSMC表型转化。部分VSMC由分化型转变为(本文来源于《河北医科大学》期刊2002-03-01）
核膜核苷叁磷酸酶论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的：建立一种检测核膜核苷叁磷酸酶(nucleoside triphosphatase，NTPase，EC 3.6.1.15)的方法，并利用大鼠主动脉内皮剥脱术后再狭窄模型，探讨内皮剥脱术后不同时间血管壁核膜NTPase活性变化及其与血管平滑肌细胞(vascular smooth musclecell，VSMC)物质代谢及细胞增殖的关系。 方法： 1．核膜NTPase测定方法的建立：(1)大鼠主动脉细胞核的提取：大鼠处死后立即取血管，刮除血管内皮后，用STM缓冲液匀浆，过滤，离心，沉淀的细胞核重悬于DS缓冲液，离心，加入裂解缓冲液，离心，取上清液测定NTPase活性。(2)核膜NTPase活性的测定：用722型分光光度计在820nm处比色测定反应产生的无机磷(Pi)。以不同浓度的KH_2PO_4做标准磷液，酶活性用nmolPi·mg~(-1)Pr·min~(-1)表示。由于刮除内皮的血管中，主要的细胞成分是VSMC，因此，本实验方法测得的NTPase活性可以反映正常及主动脉内皮剥脱后血管壁VSMC中的NTPase活性变化。 2．主动脉内皮剥脱模型的建立及分组：将SD大鼠随机分为5组，每组6只，对照组，3天组，7天组，14天组，21天组。分别于手术后3d、7d、14d、21d取大鼠 中文摘要胸腹主动脉损伤部位血管段进行形态学观察和 NTPase活性及相关指标的测定。 3．主动脉平滑肌 a－肌动蛋白oM a《ctin）和骨桥蛋白bsteopontin，OPN）Western印迹分祈：取对照组、主动脉内皮剥脱术后3天、7天、14天、ZI天的大鼠主动脉蛋白提取液进行SDS－PAGE。电印迹转至硝酸纤维素膜上，随后与一抗、h抗进行结合反应，Western印迹结果用美国 Kodak公司 ID数码成像分析系统软件进行定量分析。 4．主动脉 5’－核昔酸酶（5’－nucleotidase，5’－NT EC3．l．3．5）、腺昔脱氨酶（adenosine de删Inase，ADA，EC3．5．4．4）和琉琅酸脱氢酶（succinate dehydrogenase，SDH，EC．3．99＊）活性的测定：大鼠主动脉匀浆后的上清用于测定 5’－NT和 SDH的活性，主动脉细胞核提取液用于测定ADA的活性。 结果： 1．核膜NTPase测定方法的建立：根据NTPase水解核昔叁磷酸生成的无机磷可与钥酸作用生成磷钥酸，后者可被还原剂还原成钥蓝的原理，用比色法测定NTPase活性。结果表明：本实验所建立的方法重复性好（批内差异3．8％叶．72％之间，批间差异系数为4．7％，均小于5％；酶活性为 10 u mol／L－250 u mol／L时线性关系最好，最低检出限为 5 u mol／L人 说明该方法具有稳定、灵敏、可靠、简便易行等优点，适于一般实验室应用。 2．主动脉内皮剥脱模型的建立：大鼠主动脉切片经HE染色显示，正常对照组大鼠主动脉壁各层结构完整， 2 中文摘要 内膜光滑，中膜VSMC排列整齐。主动脉内皮剥脱后3 大时，与正常血管壁相比，内膜显得粗糙，局部可见增生： 内皮剥脱后7天时，内膜出现显着的不规则增生，新生内 膜中可见局灶性细胞增殖，中膜VSMC核排列紊乱，在 新生内膜弹性膜附近处，VSMC走行改变，凸向管腔；术 后14上 大，内膜呈进行性弥漫性增厚，管腔变小，增厚 的内膜以细胞成分为主。上述形态学变化提示本研究所建 立的内皮剥脱后血管再狭窄动物模型是成功的。 3．主动脉内皮剥脱术后血管壁核膜NTPase活性的动 态变化：大鼠主动脉内皮剥脱后3大，NTPase活性较对 照组略有升高，但不明显（P＞0刀5人 至7天时，NTPase 活性显着升高（尸＜0刀5人 约为对照组的2倍。主动脉内 皮剥脱后14无至ZI大，该酶的活性持续升高，至ZI大 时，其活性是对照组的3倍左右。NTPase活性变化与血 管新生内膜厚度呈正相关（r＝o．918，P＜0刀5人 4．主动脉内皮剥脱术后VSMC表型标志蛋白的表达 变化：Western印迹分析表明，正常血管中分化型VSMC 标志蛋白 SM a仑ctin高表达，剥脱后 3天，SM。刁ctin 表达开始下降；7大时，SM Q《ctin的水平较对照降低了 24％；至 ZI 天时，SM Q－actin下降了 3 8％。SM Q－actin 的变化趋势与血管壁病变程度成反相关。OPN是去分化 型VSMC的标志蛋白，在正常大鼠主动脉OPN含量极微， 内皮剥脱后3天，动脉壁OPN水 迅速升高，达对照组 的13．3倍；至14大时，＊PN表达釉。达到高峰，是对照 组的3O二倍：内皮剥脱后刀天时，0＊N略有降低，但仍 维持在较高水平。OPN表达的时程变化与血管内膜增厚 3 中文摘要具有明显的正相关性。上述结果提示，内皮损伤诱发了中膜VSMC表型转化。部分VSMC由分化型转变为
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
核膜核苷叁磷酸酶论文参考文献
[1].聂磊,韩梅,温进坤.核膜核苷叁磷酸酶研究进展[J].中国老年学杂志.2003
[2].聂磊.核膜核苷叁磷酸酶活性测定及其在血管再狭窄过程中的意义[D].河北医科大学.2002