核糖体失活蛋白论文_刘洋,曹雪玮,卢美雅,王富军,赵健

导读:本文包含了核糖体失活蛋白论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:核糖体,蛋白,膀胱癌,鼻疽,霍尔,活性,商陆。

核糖体失活蛋白论文文献综述

刘洋,曹雪玮,卢美雅,王富军,赵健[1](2019)在《通过细胞穿膜肽和皂苷增强一种核糖体失活蛋白抗肿瘤活性》一文中研究指出将核糖体失活蛋白类鼻疽伯克霍尔德菌致死因子1(BLF1)与细胞穿膜肽(CPP)HBP融合表达并与商陆皂苷甲(EsA)联合使用,提高BLF1重组蛋白抑制肿瘤细胞生长的活性。通过原核表达及NI-NTA亲和层析纯化BLF1、BLF1-HBP融合蛋白,以HepG2、MCF-7、A549和HeLa细胞为检测模型,MTT法检测BLF1重组蛋白对肿瘤细胞的毒性,激光共聚焦显微镜观察重组蛋白进入细胞效率,流式细胞术分析抗肿瘤效应。结果显示,穿膜肽HBP可有效提高BLF1对HepG2、MCF-7、A549和HeLa四种肿瘤细胞的生长抑制作用,其中对HeLa细胞的药效增强效果最显着,可达47.5倍;皂苷EsA的使用进一步显着提高了BLF1-HBP对上述4种肿瘤细胞生长抑制活性,且对MCF-7细胞的IC50值从6 840 nmol/L降至0.57 nmol/L。激光共聚焦观察揭示EsA可有效促进BLF1重组蛋白进入肿瘤细胞效率,流式结果分析表明EsA可大大强化BLF1-HBP诱导肿瘤细胞凋亡的能力。将BLF1与穿膜肽HBP融合表达并在EsA存在下,可显着提升BLF1对肿瘤细胞的毒性,强化其诱导肿瘤细胞凋亡的能力。(本文来源于《生物技术通报》期刊2019年08期)

庞昆,陈波,郝林,史振铎,周荣升[2](2019)在《苦瓜Ⅰ型核糖体失活蛋白对膀胱癌迁移能力的影响及机制研究》一文中研究指出目的研究苦瓜Ⅰ型核糖体失活蛋白(MAP30)对膀胱癌迁移能力的影响及机制。方法采用MTT法计算MAP30对人膀胱癌5637和T24细胞的半数抑制浓度(IC50)后,采用此浓度的MAP30通过细胞划痕迁移实验和Transwell细胞迁移实验来评估两种细胞的迁移能力,并用Western blot分别检测两种肿瘤细胞加入MAP30后基质金属蛋白酶(MMPs)和黏附分子N-cadherin等蛋白的表达。结果细胞划痕迁移实验:5637细胞加药组和对照组在8 h和22 h迁移率比较差异均有统计学意义(P <0. 05),T24细胞加药组和对照组间8 h迁移率差异无统计学意义(P> 0. 05),在22 h迁移率差异有统计学意义(P <0. 05)。MAP30干预后,人膀胱癌5637细胞和T24细胞中Vimentin、Fibronectin、MMP-2、MMP-9、N-Cadherin蛋白的表达明显降低。人膀胱癌5637细胞E-Cadherin表达降低,但人膀胱癌T24细胞未检测到目的条带。结论苦瓜Ⅰ型核糖体失活蛋白MAP30通过抑制上皮-间质细胞转化(EMT)途径和抑制MMPs表达,可以有效抑制人膀胱癌5637和T24细胞的迁移能力。(本文来源于《中国医师杂志》期刊2019年02期)

黄梦琦,周娴,李婧姝,郭诗华,崔永红[3](2018)在《植物核糖体失活蛋白研究进展》一文中研究指出核糖体失活蛋白(Ribosome-inactivating proteins,RIPs)是广泛存在于高等植物体内的一类毒蛋白,其作用位点多为细胞的核糖体大亚基RNA。该蛋白通过去除核糖体RNA(rRNA)中一个或多个腺嘌呤残基,导致rRNA断链且核糖体结构被破坏,不能正常结合蛋白质合成过程中的延伸因子,进而导致植物体的蛋白质生物合成受抑制。有研究表明,RIPs对多种病菌、害虫具有广谱抗性,这一特性使得RIPs在农业领域具有很高的应用价值,可用于培育转基因作物、抗虫活性、研制免疫毒素等。(本文来源于《四川农业科技》期刊2018年08期)

薛亚杰,余亚军,侯佳佳,程柯,韩雅彭[4](2018)在《被子植物中核糖体失活蛋白基因家族分子进化研究》一文中研究指出利用34种具有全基因组数据的代表植物,通过生物信息分析方法,深入挖掘和分析不同植物类群基因组中RIPs基因家族的成员构成,推测其可能的扩增方式和功能分化,并探讨了该基因家族在植物中的总体进化趋势.采用BLAST和HMMsearch两种检索方法共鉴定出79个RIPs基因家族成员;通过序列比对和系统进化树的构建,发现RIPs在单双子叶中存在双起源,RIPs在两者分化之前就已存在.它们可能为适应复杂的环境而出现在早期陆生植物中,随后在长期进化过程中不断发生谱系的扩张和拷贝丢失,最后通过功能分化在不同植物中保留下来,其在被子植物进化的过程中有物种特异性的重复.(本文来源于《信阳师范学院学报(自然科学版)》期刊2018年03期)

程慧珍[5](2018)在《叁角梅核糖体失活蛋白在毕赤酵母中的表达及其抗肿瘤功能研究》一文中研究指出核糖体失活蛋白(ribosome-inactivating proteins,RIPs)是广泛存在于高等植物的一类RNA N-糖苷酶,它能够催化断裂真核生物28S rRNA的特殊颈环结构的N-C糖苷键,脱去一个腺嘌呤,从而破坏核糖体的结构,阻遏蛋白质的生物合成。近年来,利用核糖体失活蛋白构造与抗癌药物结合构造的免疫毒素在治疗癌症方面显示出广阔的应用前景。叁角梅核糖体失活蛋白Bouganin最初从红花叁角梅(Bougainvillea spectabilis wild)中分离,为Ⅰ型核糖体失活蛋白,是目前所发现的毒性最低的一种RIPs。本实验室利用同源序列克隆法从厦门市紫叶叁角梅中成功克隆Bouganin基因并进行了原核表达等研究工作。但由于原核表达的蛋白多以包涵体的形式存在,纯化困难,另外原核表达蛋白免疫制备的抗体效价不高。本研究克隆了叁角梅核糖体失活蛋白基因Bouganin,然后以毕赤酵母(Pichia pastoris GS115)为表达菌株中,以pPIC9K为载体,构建了GS115-pPIC9K-Bouganin酵母的体外表达系统,然后对表达条件进行优化,最后利用固相金属离子亲和层析(IMAC)纯化得到Bouganin蛋白,并进行了 MTT法抗肿瘤活性鉴定。研究结果表明(1)所得到的酵母GS115转化子表型是muts型,利用的是酵母表达系统的AOX2启动子;(2)最佳表达时间为48 h,最佳表达温度为22℃;(3)重组蛋白Bouganin能够分泌到培养基中,纯化方便,但是表达量相对前期本实验室原核表达该蛋白低,为0.225 mg/L;(4)MTT法抗肿瘤活性鉴定表明其对肿瘤细胞的抑制性比原核表达的Bouganin蛋白的抑制效果略好,在Bouganin加入浓度为100ug/mL时,真核Bouganin蛋白对Hela、HEP3B、A549细胞的抑制率分别为为27.75%、18.05%、20.68%,而原核Bouganin蛋白抑制率分别为为20.27%、6.84%、13.79%。经过单因素方差分析,各个浓度下真核和原核Bouganin蛋白对肿瘤细胞的抑制率之间不具有显着性。(本文来源于《厦门大学》期刊2018-05-01)

张杨雪,蒋楠,吉柔风,舒苹银,冉雨露[6](2017)在《一种提取土壤样品中麻疯树核糖体失活蛋白curcin的方法》一文中研究指出建立并优化了一种土壤麻疯树核糖体失活蛋白curcin的提取方法.优化后的提取步骤和参数为:0.1 g含curcin的土壤样品加入1 m L的提取缓冲液(5 mmol/L磷酸盐,0.1 mmol/L EDTA,0.2%SDS(m/V),20 mmol/Lβ-巯基乙醇,p H7.2),在18℃以上的室温条件下振荡混匀1 h,离心取上清液.重复该过程一次,合并上清液.上清液于4℃放置过夜,离心取上清液,即为样品粗提液.该样品粗提液即可用单克隆抗体间接酶联免疫吸附法(ELISA)进一步检测其中的curcin含量.该方法对curcin含量高于8μg/g土壤可进行定性检测,对于curcin含量分别为100、500、1 000μg/g的土壤样品的回收率分别达到49.3%±2.8%、64.2%±3.62%和78.33%±4.24%.该方法的变异系数保持在5%左右,对来自四川3个样地的土壤有较好的适用性.本研究建立优化的提取方法可为评估curcin蛋白在农业领域应用的生态风险提供技术支持.(本文来源于《应用与环境生物学报》期刊2017年06期)

庞昆[7](2017)在《苦瓜I型核糖体失活蛋白对膀胱癌迁移能力的影响及机制研究》一文中研究指出目的:研究苦瓜I型核糖体失活蛋白(MAP30)对膀胱癌迁移能力的影响及机制。方法:采用MMT法计算MAP30对人膀胱癌5637和T24细胞的IC50后,采用此浓度的MAP30通过细胞划痕迁移实验和Transwell细胞迁移实验来评估两种细胞的迁移能力,并用Western Blot分别比较两种肿瘤细胞加入MAP30后基质金属蛋白酶(MMPs)和黏附分子N-cadherin等蛋白的表达。结果:细胞划痕迁移实验:5637细胞在8h和22h迁移率差异均有统计学意义(p<0.05),T24细胞在8h迁移率差异无统计学意义(p>0/05),在22h迁移率差异有统计学意义(p<0.05)。加MAP30后的人膀胱癌5637细胞和T24细胞中Vimentin、Fibronectin、MMP-2、MMP-9、N-Cadherin蛋白的表达明显降低。人膀胱癌5637细胞E-Cadherin表达降低,但人膀胱癌T24细胞未检测到目的条带。结论:苦瓜I型核糖体失活蛋白MAP30通过抑制EMT途径和抑制MMPs表达,可以有效抑制人膀胱癌5637和T24细胞的迁移能力。(本文来源于《2017年第五次世界中西医结合大会论文摘要集(中册)》期刊2017-12-06)

史振铎[8](2017)在《苦瓜Ⅰ型核糖体失活蛋白对膀胱癌抑制作用的研究》一文中研究指出目的:通过研究苦瓜MAP30对膀胱癌细胞形态、增殖、侵袭和凋亡的影响,并进一步研究与凋亡和侵袭有关因子活性表达的变化,阐明MAP30抑制肿瘤的机制。并进一步研究苦瓜蛋白对膀胱微环境的影响。方法:获得纯化的具有生物学功能的MAP30蛋白,检测其蛋白活性,脂质体包载MAP30蛋白,并对MAP30蛋白进行体外的功能测试,确定MAP30蛋白对肿瘤细胞的半数致死量,从而确定最佳作用剂量和时间。对膀胱癌细胞系进行细胞活性检测,细胞凋亡检测以及药物对细胞迁移和侵袭的影响检测。建立膀胱癌裸鼠模型,检测MAP30蛋白对膀胱癌荷瘤小鼠的治疗效果。利用毒理基因组技术研究MAP30肝毒性的作用机制,利用代谢组学技术研究MAP30的毒理机制。结果:通过全基因合成密码子优化过的MAP30基因序列,在其两端分别引入BamHⅠ和XhoⅠ酶切位点,插入原核表达载体pET-28a中,在BL21(DE3)大肠杆菌中融合表达C端含有his-tag的MAP30蛋白,进一步分离纯化得到MAP30蛋白。MTT法检测MAP30蛋白对T24细胞生长影响,细胞生长受到抑制,验证分离得到的MAP30具有生物学活性。应用包载蛋白的脂质体采用薄膜水化法制备,通过薄膜水化法进行制备包载MAP30的脂质体,计算包封率为78%。通过MAP30体外检测可知MAP30促进了凋亡中的关键蛋白Caspase3的表达,增强了Caspase3的活力,抑制了促进肿瘤转移的蛋白MMP2的表达;抑制了促进细胞增殖的NF-kB及JNK的表达,因此MAP30蛋白对于肿瘤的抑制作用可能是通过促进凋亡和抑制增殖的共同作用。建立裸鼠膀胱癌模型,将MAP30注射于裸鼠腹腔,观察肿瘤生长缓慢或缩小,毒理基因组及代谢组学技术检测结果得知MAP30对DNA的损伤不明显,对小鼠肝肾功能影响较小。结论:首次将苦瓜Ⅰ型核糖体失活蛋白MAP30应用于膀胱癌的治疗,阐明了苦瓜Ⅰ型核糖体失活蛋白MAP30对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的抑制作用,抑制膀胱癌细胞生长,为膀胱癌免疫治疗提供理论和实验依据。同时为广大患者提供一种可能的治疗方法,为进一步新药的研发提供理论依据。(本文来源于《2017年第五次世界中西医结合大会论文摘要集(中册)》期刊2017-12-06)

徐克凡[9](2017)在《叁角梅核糖体失活蛋白(bouganin)多态性组织品种差异研究》一文中研究指出核糖体失活蛋白(Ribosome-inactivating protein,RIPs)是一类具有细胞毒性的,特异性催化断裂核糖体大亚基rRNA N-C糖苷键的N-糖苷酶。RIPs具有对肿瘤细胞,动物病毒及多种植物病毒,植物病害真菌及农业害虫的抗性,在医学和农业上应用潜力巨大。RIPs广泛存在于高等植物中,且在同种中多态性丰富。多态性的发现对追踪RIPs的起源及其功能的深入研究有重要意义。本研究以艳紫叁角梅为材料,通过克隆同源序列进行体外表达制备抗体,以亲和层析法分离纯化艳紫叁角梅(Bougainvillea glabra)和红花叁角梅(Bougainvillea spectabilis)中的天然Bouganin,然后通过对亲和层析分离的蛋白进行质谱法分析,确定Bouganin蛋白的多样性。本研究主要结果及结论如下:1.天然Bouganin确实存在多态性。在红花叁角梅中发现3种异构体:Uuiprot编号分别为Q09EH2,A0A0D3RWN7和Q8W4U4。而在艳紫叁角梅中发现了 4种异构体,除红花叁角梅的3种外,另有编号为Q5J7U5的异构体,为艳紫叁角梅叶所特有。2.Bouganin在同种叁角梅的不同器官中的种类基本相同,但各异构体在不同器官的相对含量存在较大差异。3.实验所发现的4种Bouganin异构体中,Q09EH2、Q5J7U5与Q8W4U4均为305个氨基酸组成,而A0A0D3RWN7仅含238个氨基酸。4.实验所发现的4种Bouganin异构体均具有一定的同源性,其中A0A0D3RWN7、Q5J7U5 与 Q8W4U4 具有高同源性。接下来可首先改进亲和层析技术,提高实验结果的可重复性。之后对Bouganin多态性的研究可结合转录组学和结构生物学,从微观角度了解Bouganin异构体活性差异的结构基础。(本文来源于《厦门大学》期刊2017-12-01)

党刘毅,Pierre,Rougé,Els,JM,Van,Damme[10](2017)在《核糖体失活蛋白及其在黄瓜中的表达分析(英文)》一文中研究指出核糖体失活蛋白是一类具有高度特异性r RNA N-糖苷酶活性的蛋白,它们能够使原核或真核细胞的核糖体失活因而具有细胞毒性.由于其独特的生物学性质,核糖体失活蛋白被认为在农业和医学中都有着巨大的应用潜力.我们之前的研究表明,黄瓜的基因组中共包含2个2类核糖体失活蛋白基因,分别命名为Cumsa AB1和Cumsa AB2.以蓖麻毒蛋白Ricin为代表,2类核糖体失活蛋白通常由2条二硫键连接的肽链组成:具有N-糖苷酶活性的A链与具有凝集素活性的B链.本文研究了黄瓜中核糖体失活蛋白的表达情况.亚细胞定位研究表明Cumsa AB1经过蛋白分泌通路表达于细胞外,这与蛋白质序列分析显示的Cumsa AB1包含一个信号肽而不含转膜区域相一致.对黄瓜的不同生长阶段的不同组织中的转录水平分析表明,Cumsa AB1在大部分组织中以极低的水平表达,而Cumsa AB2表达水平则明显更高,尤其在第一片真叶阶段和刚开花的植物中.最后,我们使用分子模拟对黄瓜中核糖体失活蛋白的结构及糖结合位点进行了分析.本研究对黄瓜中核糖体失活蛋白的亚细胞定位、表达水平和可能的蛋白质结构进行了研究,为其进一步的生物学功能研究提供了重要信息.(本文来源于《生物化学与生物物理进展》期刊2017年10期)

核糖体失活蛋白论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的研究苦瓜Ⅰ型核糖体失活蛋白(MAP30)对膀胱癌迁移能力的影响及机制。方法采用MTT法计算MAP30对人膀胱癌5637和T24细胞的半数抑制浓度(IC50)后,采用此浓度的MAP30通过细胞划痕迁移实验和Transwell细胞迁移实验来评估两种细胞的迁移能力,并用Western blot分别检测两种肿瘤细胞加入MAP30后基质金属蛋白酶(MMPs)和黏附分子N-cadherin等蛋白的表达。结果细胞划痕迁移实验:5637细胞加药组和对照组在8 h和22 h迁移率比较差异均有统计学意义(P <0. 05),T24细胞加药组和对照组间8 h迁移率差异无统计学意义(P> 0. 05),在22 h迁移率差异有统计学意义(P <0. 05)。MAP30干预后,人膀胱癌5637细胞和T24细胞中Vimentin、Fibronectin、MMP-2、MMP-9、N-Cadherin蛋白的表达明显降低。人膀胱癌5637细胞E-Cadherin表达降低,但人膀胱癌T24细胞未检测到目的条带。结论苦瓜Ⅰ型核糖体失活蛋白MAP30通过抑制上皮-间质细胞转化(EMT)途径和抑制MMPs表达,可以有效抑制人膀胱癌5637和T24细胞的迁移能力。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

核糖体失活蛋白论文参考文献

[1].刘洋,曹雪玮,卢美雅,王富军,赵健.通过细胞穿膜肽和皂苷增强一种核糖体失活蛋白抗肿瘤活性[J].生物技术通报.2019

[2].庞昆,陈波,郝林,史振铎,周荣升.苦瓜Ⅰ型核糖体失活蛋白对膀胱癌迁移能力的影响及机制研究[J].中国医师杂志.2019

[3].黄梦琦,周娴,李婧姝,郭诗华,崔永红.植物核糖体失活蛋白研究进展[J].四川农业科技.2018

[4].薛亚杰,余亚军,侯佳佳,程柯,韩雅彭.被子植物中核糖体失活蛋白基因家族分子进化研究[J].信阳师范学院学报(自然科学版).2018

[5].程慧珍.叁角梅核糖体失活蛋白在毕赤酵母中的表达及其抗肿瘤功能研究[D].厦门大学.2018

[6].张杨雪,蒋楠,吉柔风,舒苹银,冉雨露.一种提取土壤样品中麻疯树核糖体失活蛋白curcin的方法[J].应用与环境生物学报.2017

[7].庞昆.苦瓜I型核糖体失活蛋白对膀胱癌迁移能力的影响及机制研究[C].2017年第五次世界中西医结合大会论文摘要集(中册).2017

[8].史振铎.苦瓜Ⅰ型核糖体失活蛋白对膀胱癌抑制作用的研究[C].2017年第五次世界中西医结合大会论文摘要集(中册).2017

[9].徐克凡.叁角梅核糖体失活蛋白(bouganin)多态性组织品种差异研究[D].厦门大学.2017

[10].党刘毅,Pierre,Rougé,Els,JM,Van,Damme.核糖体失活蛋白及其在黄瓜中的表达分析(英文)[J].生物化学与生物物理进展.2017

论文知识图

酶联免疫吸附法测定麻疯树核糖体失蓖麻种子核糖体失活蛋白稳定性...菊芋凝集素一甘露糖(1,3)甘露糖D.11型...蓖麻种子核糖体失活蛋白的亲和...蓖麻种子核糖体失活蛋白的电泳...MAP30处理BGC823细胞的透射电镜观察(...

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